大鼠卵泡基膜原代细胞

大鼠卵泡基膜原代细胞

大鼠卵泡基膜细胞（卵泡膜细胞）分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。哺乳动物的卵巢内卵泡的发育需要相关激素的调节才能完成，用下协同合成的，卵泡膜细胞合成的雄激素透过基膜进入颗粒细胞，并转变为雌激素。因此，卵泡膜细胞在生殖内分泌调节中占有关键的位置，了解其在病理及生理中的作用，对于与性激素有关的妇产科疾病（如多囊卵巢综合症、卵巢癌等）的研究有着重要意义。在哺乳动物卵泡生长发育的过程中，卵母细胞由不断增加的颗粒细胞层包裹。卵巢组织中的膜细胞作为卵泡的外层细胞可以维持卵泡结构的完整性，参与构成卵母细胞和颗粒细胞发育的微环境且为类固醇激素的生成提供底物。在哺乳动物中调节膜细胞类固醇激素生成的机制已见相关报道，但是有关卵泡膜细胞的聚集、生长和分化的研究尚不深入。

产品名称：大鼠卵泡基膜细胞

组织来源：卵巢

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件：

培养基：含FBS、EGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠卵泡基膜细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。

方法简介

实验室分离的大鼠卵泡基膜采用先机械分离后胶原酶消化结合Percoll密度梯度离心法、并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠卵泡基膜经3β-HSD免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

兔子促黄体激素(LH)ELISA 试剂盒

Human vascular endothelial cadherin complex (VE-cad) ELISA Kit 人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)试剂盒

Humanai-neuophilaibody,ANAELISAKit 人抗粒细胞抗体(ANA)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanerythrocytemembraneprotein,EMP试剂盒人红细胞膜蛋白(EMP)试剂盒规格：96T/48T

组织RSE激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanOsteoprotegerin，OPGELISAKit人骨保护素(OPG)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)试剂盒 ，英文名： SCF/MGF ELISA Kit

Human para aminobenzoic acid (PABA) ELISA Kit 人对(PABA)试剂盒

RabbitCollagenaseIELISAKit 兔子胶原酶I(CollagenaseI)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforb-FABP(Humanbrainfattyacidbindingprotein)ELISAKit人脑型脂肪酸结合蛋白

细菌糖酵解MRVP试剂盒20次

RabbitIerferonα,IFN-αELISAKit兔子α干扰素(IFN-α)试剂盒规格：96T/48T

人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人抗鼠抗体(HAMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人抗鼠抗体(HAMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人钙离子通道抗体(VGCC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

FCAR重组大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人类疱疹病毒8抗原

EPOR重组人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

IP6K1 Protein Human 重组人 IHPK1 蛋白 (His & GST 标签)

CA8 Protein Mouse 重组小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白

CHL仓鼠肺细胞 CHL hamster lung cells DMEM+10%FBS  MLTC-1(小鼠间质细胞瘤细胞)     U251人胶质瘤细胞 子宫内膜癌细胞，HEC-1B细胞 MDA-MB-468(癌细胞)  原代骨骼肌细胞特制无血清添加剂Many 小鼠原代杏仁核神经元细胞 兔原代纤维环细胞

大鼠卵泡基膜原代细胞嗅素4(OLFM4)重组蛋白 Recombinant Olfactomedin 4 (OLFM4)

IL22RA2 Protein Human 重组人 IL22BP / IL22RA2 蛋白

ADAM15重组人 ADAM15 / MDC15 蛋白 Protein

Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 标签)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 标签) Protein