大鼠卵巢成纤维原代细胞

大鼠卵巢成纤维原代细胞

大鼠卵巢成纤维细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。卵巢成纤维细胞大多分布于卵巢表面，其主要特点和功能：①成纤维细胞在体外易于培养；②卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢；③能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。

产品名称：大鼠卵巢成纤维细胞

组织来源：卵巢组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠卵巢成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠卵巢成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

兔子高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 试剂盒

People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)试剂盒

Humanai-macrophageaibodyELISAKit 人抗巨噬细胞抗体(ai-macrophageAb)试剂盒 96T/48T 进口分装

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组织PKG激酶总活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human cytokeratin 18 (CK-18) ELISA Kit 人细胞角蛋白18(CK-18)试剂盒

Humanmicroansferrinuria,MTFELISAKit 人微量转铁蛋白(MTF)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCyclinDependeKinase5,CDK5试剂盒人周期素依赖性激酶5(CDK5)试剂盒规格：96T/48T

组织FGFR4激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPresenilin2,PS-2ELISAKit人早老素2(PS-2)试剂盒规格：96T/48T

人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)试剂盒   96T/48T

人状瘤病毒抗体(HPV)试剂盒   96T/48T

人瘤病毒58（HPV-58）试剂盒   96T/48T

人瘤病毒18（HPV-18）试剂盒   96T/48T

CXADR重组小鼠 CXADR / CAR 蛋白 Protein

骨成型蛋白2(BMP2)重组蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)

PDHA1重组人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 标签) Protein

CEACAM3 Protein Human 重组人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

TGFB2 Protein Canine 重组狗 TGFB2 / TGF-beta 2 蛋白

CFSC-2G细胞，大鼠肝星形细胞 7721(7721肝癌细胞) tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-3E6  RK1 Others Human 人 kA / RK1 人细胞裂解液   散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21 人成纤维细胞，Hs 578Bst细胞 小鼠原代胸主动脉平滑肌细胞 小鼠原代巩膜成纤维细胞

大鼠卵巢成纤维原代细胞转铁蛋白受体(TFR)天然蛋白 Native Transferrin Receptor (TFR)

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

CD6重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 Protein

PRLR Protein Rat 重组大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

CCL1重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 Protein