大鼠颅盖造骨原代细胞

大鼠颅盖造骨原代细胞

大鼠颅盖造骨细胞分离自颅骨组织；造骨细胞（osteoblast）亦称成骨细胞。是参与骨组织形成的细胞。颅骨位于脊柱上方，由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外，其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结，起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部，内有颅腔，容纳脑，共8块。面颅为颅的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等结构，构成面部的支架，共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞，负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建，骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨；破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础，也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。

产品名称：大鼠颅盖造骨细胞

组织来源：颅骨

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠颅盖造骨细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。

方法简介

实验室分离的大鼠颅盖造骨采用胶原酶消化法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠颅盖造骨经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA 试剂盒

People leils binding type AFP / AFP Varia 3 (AFP-L3) ELISA kit E 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)试剂盒E

Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISAKit 重链(IgH)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAE试剂盒人泛素激活酶(E1/UBAE)试剂盒规格：96T/48T

组织PAK1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

humanperoxisomeproliferativeactivatedreceptorgamacoactivator1alpha,PPARGC1ELISAKit人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠甘露聚糖结合凝集素关联丝酸蛋白酶1(MASP1)试剂盒 ，英文名： MASP1 ELISA Kit

Human calnexin (calnexin) ELISA Kit 人钙联蛋白(calnexin)试剂盒

rabbitCoicosterone,COELISAKit 兔子皮质酮/肾上腺酮(CO)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforB7-2/sCD86(MousesolubleClusterofdiffereiation86)ELISAKit小鼠可溶性CD86

线虫甲磺酸乙脂(EMS)诱导突变试剂盒10次

RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒规格：96T/48T

人粘蛋白21(MUC21)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human MUC21 (Mucin 21) ELISA Kit

人伴侣蛋白10(CPN10)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit

人趋化素(CHEM)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CHEM(Chemerin) ELISA Kit

人趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit

FCGR3重组小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 Protein

Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)

CD1B重组人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 标签) Protein

CD46 Protein Human 重组人 CD46 蛋白

CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 标签)

CFR Others Rat 大鼠 CFR / CFR-alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野猪 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人细胞裂解液 大鼠雪旺细胞 Rattus 小鼠原代嗅鞘细胞 兔原代子宫内膜间质细胞

大鼠颅盖造骨原代细胞泛素(Ub)重组蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

PTPN11重组小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

EFNA5 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

PRKAR1A重组人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。