详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
实验室分离的大鼠淋巴血管内皮采用蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的大鼠淋巴血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠淋巴血管内皮原代细胞 | 组织来源 | 淋巴管 |
英文名称 | Rat Lymphatic Vascular Endothelial Cells | 货号 | YS-01X8240 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
大鼠淋巴血管内皮细胞分离自淋巴血管组织;淋巴管由毛细淋巴管汇合而成。其形态结构与静脉相似,但管径较细,管壁较薄,瓣膜较多且发达,外形呈串珠状。淋巴管根据其位置分为浅、深二种。它们管位于皮下,常与浅静脉伴行,收集皮肤和皮下组织的淋巴。深淋巴管与深部血管伴行,收集肌肉和内脏的淋巴。浅、深淋巴管之间有广泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常经过一个或多个淋巴结,从而把淋巴细胞带入淋巴液。主要功能是滤过淋巴液,产生淋巴细胞和浆细胞,参与机体的免疫反应。当局部感染时,细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴结肿大。如该淋巴结不能阻止和消灭它们,则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移。淋巴管内皮细胞(LEC)是衬覆于淋巴管内表面的一种单层扁平上皮,是构成淋巴管壁的主要结构,参与维持体液平衡,调节淋巴细胞再循环和机体的免疫反应和组织液及蛋白质的运输,在疾病过程中也起着重要作用。近年研究表明,LEC还在伤口愈合、淋巴管水肿和炎症扩散等病理过程中起重要作用,而且与肿瘤转移密切相关。淋巴管内皮细胞主要功能:①调节体液、蛋白和组织压力平衡;②为免疫系统的重要组成部分。淋巴管内皮细胞与主要病生理变化:①囊肿型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴结核。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠淋巴血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品:
兔子内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 试剂盒
People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)试剂盒E
Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受体(poly-IgR)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humandynorphin,Dyn试剂盒人强啡肽(Dyn)试剂盒规格:96T/48T
组织P38a激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)试剂盒规格:96T/48T
豚鼠谷转酶(ALT)试剂盒 ,英文名: ALT ELISA Kit
Human calmodulin (CAM) ELISA Kit 人钙调素(CAM)试剂盒
rabbitEndostatin,ESELISAKit 兔子内皮抑素(ES)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBACE2ELISAKit大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2
线虫繁殖培养试剂盒10次
rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒规格:96T/48T
小鼠细胞色素氧化酶(CC0)试剂盒 96T/48T
小鼠(Cyt-C)试剂盒 96T/48T
小鼠细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)试剂盒 96T/48T
小鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)试剂盒 96T/48T
TNFSF12重组食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)
TPH1重组人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
IL1R2 Protein Human 重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白
MERTK Protein Mouse 重组小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 标签)
CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人细胞裂解液 IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 CM-H046人肝星形细胞中和液TNS b16 小鼠黑色素瘤细胞 小鼠原代嗅球神经干细胞 人原代结肠粘膜上皮细胞
大鼠淋巴血管内皮原代细胞凋亡相关因子配体(FASL)重组蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
AK4 Protein Human 重组人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 标签)
CD24重组小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 Protein
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 标签)
NAPG重组人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 标签) Protein
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。