大鼠髋臼软骨原代细胞

大鼠髋臼软骨原代细胞

大鼠髋臼软骨细胞分离自髋关节软骨组织，髋关节是人体最大、的关节之一，是典型的球臼关节。髋关节既具有良好的内在稳定性，也具有灵活的活动性。髋臼位于髋骨外侧面中央，呈半球形深凹，直径约30~50mm，表面覆盖厚约2mm的透明关节软骨，呈半月形分布。中央是髋臼窝，无软骨覆盖，由哈佛腺充填，可以随关节内压力的增减挤出或者吸入关节液，以维持关节内压力的平衡。髋臼边缘的环形关节盂唇可以加深、加宽髋臼，使髋臼容纳股骨头的大部并处于稳定的位置，加强了髋关节的稳定性。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层，单个分布、体积较小、呈椭圆形，长轴与关节软骨表面平行，越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形、染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内，这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，关节软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，关节软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

产品名称：大鼠髋臼软骨细胞

组织来源：软骨组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次；

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠髋臼软骨采用胶原酶联合蛋白酶消化制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠髋臼软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

兔子血小板活化因子(PAF)ELISA 试剂盒

Rat angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 大鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)试剂盒

Humanhiston-H2bELISAKit 人组蛋白H2b(histon-H2b)试剂盒 进口分装

Humancytovillin/ezrin,CVL试剂盒人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)试剂盒

组织INSULI激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)试剂盒

小鼠K1(VK1)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨钙素/骨谷蛋白(OT/BGP)试剂盒

HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin4,IL-4试剂盒鸡白介素4(IL-4)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKit小鼠糖蛋白130(gp130)试剂盒规格：96T/48T

小鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒   96T/48T

小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)试剂盒   96T/48T

小鼠纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)试剂盒   96T/48T

小鼠纤连蛋白(FN)试剂盒   96T/48T

G-250快速无毒型蛋白质染色试剂 100ml

Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein 0.5mgTsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原

NCR3重组人 NCR3 / NKp300 蛋白 Protein

IL23 Protein Human 重组人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白

IL1RAP Protein Human 重组人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 (His & Fc 标签)

CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 人细胞裂解液   mCF, 小鼠心脏成纤维细胞 小鼠杂交瘤细胞，7F2细胞 EL4. IL-2(淋巴瘤细胞)  BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人细胞裂解液 小鼠原代牙髓干细胞 人原代肺动脉外膜成纤维细胞

大鼠髋臼软骨原代细胞CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依赖性激酶4(抗原)

AKR1B1 Protein Human 重组人 AKR1B1 蛋白 (His 标签)

SERPINF2重组小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 标签) Protein

SFRP4 Protein Mouse 重组小鼠 sFRP4 蛋白 (His 标签)

HOXA1重组人 HOXA1 蛋白 (His 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。