大鼠结肠黏膜上皮原代细胞

大鼠结肠黏膜上皮原代细胞公司出售的产品：人原代表皮角化细胞 Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴细胞白血病细胞) 5637(HTB-9) 人膀胱癌细胞 1ml/T75 MV3 人黑色素瘤细胞 HT-29 人结肠癌细胞 小鼠原代骨骼肌成纤维细胞

大鼠结肠黏膜上皮原代细胞

大鼠结肠黏膜上皮细胞分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。探讨正常结肠黏膜上皮细胞的分离、体外培养方法，为研究肠黏膜上皮细胞以及与肠黏膜相关疾病建立合适的细胞模型。

产品名称：大鼠结肠黏膜上皮细胞

组织来源：结肠组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠结肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠结肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA 试剂盒

Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒

Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 人抗肾小球基底膜抗体(GBM)试剂盒 进口分装

HumanCyclophosphamide,CTX试剂盒人环0酰胺(CTX)试剂盒

组织HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR扩增试剂盒20次

HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人脊髓灰质病毒IgG(PV-IgG)试剂盒

猪白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒

Human ai IgE receptor aibody ELISA Kit 人抗IgE受体抗体试剂盒

Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)试剂盒 进口分装

CLIAKitforALCAMELISAKit大鼠白细胞活化黏附因子

血液(UROKINASE)活性比色法定量试剂盒20次

MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)试剂盒

人粒细胞弹性蛋白酶(NE)试剂盒   96T/48T

人中期因子(MK)试剂盒   96T/48T

人脂氧素A4(LXA4)试剂盒   96T/48T

人脂0壁酸(LTA)试剂盒   96T/48T

ADAM15重组人 ADAM15 / MDC15 蛋白 Protein

嗅素4(OLFM4)重组蛋白 Recombinant Olfactomedin 4 (OLFM4)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

IL22RA2 Protein Human 重组人 IL22BP / IL22RA2 蛋白

Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 标签)

CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人细胞裂解液   HCC827(人非小细胞肺癌细胞)     CL-0364HuT 78(人T淋巴细胞白血病细胞)中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610]  CL-0033BGC823(人胃癌细胞)  P815 小鼠肥大细胞癌细胞 小鼠原代胰岛细胞 鸡原代气管上皮细胞

大鼠结肠黏膜上皮原代细胞α1-酸性糖蛋白(α1AGP)重组蛋白 Recombinant Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP)

IL5RA Protein Human 重组人 IL5Ra / CD125 蛋白

DDC重组小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 蛋白 Protein

ENPP3 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 ENPP3 / CD203c 蛋白

PPIL1重组人 PPIL1 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。