大鼠角膜基质原代细胞

大鼠角膜基质原代细胞

大鼠角膜基质细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜基质层是角膜的主要组成部分，占据角膜厚度的90%，由角膜基质细胞、胶原纤维和细胞外基质构成。角膜基质层缺损的修复主要由角膜基质细胞的增殖及分泌细胞外基质完成。角膜基质层具有结构规整，透明度高的特点，正常情况下角膜基质细胞分泌组成基质层的成分，维持角膜的透明度，此细胞对于角膜损伤的修复具有重要意义。角膜基质细胞，存在于角膜基质层中，在正常情况下，处于静止状态。但当角膜损伤时，不同上皮来源的因子及环境信号，将影响角膜基质细胞的应答反应，决定着角膜能否被修复。

产品名称：大鼠角膜基质细胞

组织来源：眼角膜组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠角膜基质采用胶原酶消化后组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠角膜基质经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 试剂盒

Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管紧张素原(aGT)试剂盒

HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3Ab-IgG)试剂盒 进口分装

HumancyclophilinA,CyPA试剂盒人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)试剂盒

组织GSK3激酶总活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)试剂盒

豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)试剂盒 ，英文名： iFABP ELISA Kit

Human multidrug resistance associated protein (MRP) ELISA Kit 人多药耐药相关蛋白(MRP)试剂盒

rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 兔子可溶性P选择素(sP-selectin)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBetaGD(HumanBeta-glucuronidase)ELISAKit人β葡萄糖酸苷酶

细菌腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶连续循环比色法定量试剂盒20次

rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit兔子肝细胞生长因子(HGF)试剂盒规格：96T/48T

人中期因子(MK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人特异生长因子/相关因子(TSGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

PTPN11重组小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

泛素(Ub)重组蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

PRKAR1A重组人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

EFNA5 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人细胞裂解液   FD4细胞，人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞 小鼠畸胎瘤细胞,F9细胞 CM-H095人骨骼肌细胞CM-R014大鼠气管和支气管上皮细胞100mL 小鼠原代胰腺星状细胞 人原代踝或膝滑成纤维细胞

大鼠角膜基质原代细胞Morphine/BSA 与牛血清白蛋白偶联物 10mgMorphine/BSA 与牛血清白蛋白偶联物

IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白

CXCL13重组食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein

PREP Protein Mouse 重组小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白

DAPK3重组人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。