大鼠滑膜原代细胞

大鼠滑膜原代细胞

大鼠滑膜细胞分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎（OA）以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型（巨噬样滑膜细胞）、B型（成纤维样滑膜细胞）以及C型（树突细胞样滑膜细胞）细胞组成。滑膜细胞主要功能：①滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。

产品名称：大鼠滑膜细胞

组织来源：滑膜组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠滑膜采用混合酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠滑膜经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠D(VD)ELISA 试剂盒

Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)试剂盒

HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)试剂盒 进口分装

ChickenLaminin,LN试剂盒鸡层连蛋白/板层素(LN)试剂盒

载玻片细胞IP3R受体蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)试剂盒

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human thioredoxin (x) ELISA Kit 人硫氧化还原蛋白(x)试剂盒

Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 人协同刺激分子受体(CMR)试剂盒 96T/48T 进口分装

Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3试剂盒鸡坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞AIL蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受体(ER)试剂盒规格：96T/48T

蛋白酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样

碱性蛋白酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样

测试盒   紫外分光光度法   50管/48样

测试盒   可见分光光度法   50管/24样

HA重组甲型流感 H5N1 (A/duck/Laos/3295/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) 海葵神经毒素(35肽)

SERPINF1重组人 SerpinF1 / PEDF 蛋白 Protein

IL5 Protein Human 重组人 IL5 / Interleukin 5 蛋白

LXN Protein Human 重组人 Latexin / LXN / TCI 蛋白

CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 标签)  双位点HC-kit受体细胞株;DMF7  SV40T转化的人胚肾细胞;293T  HeLa 229人细胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO) 小鼠原代主动脉平滑肌细胞 人原代少突胶质细胞

大鼠滑膜原代细胞Integrin alpha 1 整合素α1抗原 0.5mgIntegrin alpha 1 整合素α1抗原

AMIGO2 Protein Human 重组人 AMIGO2 蛋白 (His 标签)

ART4重组食蟹猴 ART4 蛋白 (His 标签) Protein

LAIR1 Protein Mouse 重组小鼠 LAIR1 蛋白 (His 标签)

PIN1重组人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 (His 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。