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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的大鼠滑膜间充质干采用胶原酶消化法和低密度接种法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠滑膜间充质干经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠滑膜间充质干原代细胞 | 组织来源 | 滑膜组织 |
英文名称 | Rat Synovial Mesenchymal Stem Cells | 货号 | YS-01X7913 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
大鼠滑膜间充质干细胞分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎（OA）以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型（巨噬样滑膜细胞）、B型（成纤维样滑膜细胞）以及C型（树突细胞样滑膜细胞）细胞组成。滑膜细胞主要功能：①滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)试剂盒
Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒
HumahromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 人血栓素B2(TXB2)试剂盒 进口分装
HumanCollagenaseTypeII试剂盒人胶原酶II(CollagenaseII)试剂盒
组织ABL1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumaeceptorⅢfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅢELISAKitGFc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)试剂盒
豚鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)试剂盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
Human dopachrome isomerase (DT) ELISA Kit 人多巴色素异构酶(DT)试剂盒
rabbitCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 兔子Ⅲ型胶原(ColⅢ)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBeta-Nph(MouseBeta-naphthol)ELISAKit小鼠β萘酚
细菌B1高效液相色谱法定量试剂盒20次
rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit兔子免疫球蛋白G(IgG)试剂盒规格：96T/48T
鱼类释放激素 ELISA.
鱼类状腺原酸(T3)ELISAKit ELISA.
鱼类(Coisol)ELISAKit ELISA.
鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA.
DCN重组人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
趋化因子C-C-基元配体14(CCL14)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 14 (CCL14)
CD1D & B2M重组人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
AIMP1 Protein Human 重组人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 标签)
HA Protein H4N4 重组甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 小鼠成年表皮角质形成层细胞 前脂肪细胞Many 主动脉内皮细胞Many 叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1 FO 小鼠骨髓瘤细胞 小鼠原代主动脉外膜成纤维细胞 兔原代脑微血管内皮细胞
大鼠滑膜间充质干原代细胞踝蛋白(TLN)重组蛋白 Recombinant Talin (TLN)
ACVR1B Protein Human 重组人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His & Fc 标签)
KLRC1重组小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (His 标签) Protein
NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 标签)
CBR3重组人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白 (His 标签) Protein
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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