大鼠骺软骨原代细胞

大鼠骺软骨原代细胞

大鼠骺软骨细胞分离自骨骺生长板；骨骺生长板位于长骨两端骨骺和骨干之间的软骨组织，其中的骺软骨细胞可分裂、成熟、肥大，最终被骨组织所替换，对于长骨生长具有重要作用。幼稚的骺软骨细胞位于软骨组织的表层，单个分布、体积较小、呈椭圆形，长轴与软骨表面平行，越向深层的骺软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形，染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的骺软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内，这些骺软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，骺软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，骺软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的骺软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

产品名称：大鼠骺软骨细胞

组织来源：生长板组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每3-4天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠骺软骨采用胶原酶-蛋白酶联合消化并软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠骺软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA 试剂盒

Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)试剂盒

Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盘蛋白(PP)试剂盒 进口分装

HumancicaicialPemphigoid,CP试剂盒人瘢痕性天疱疮抗体(CP)试剂盒

组(leucine)含量比色法定量试剂盒20次

humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)试剂盒

鱼免疫球蛋白M(IgM)试剂盒

Human collagen aoaibody (CLA) ELISA Kit 人抗胶原蛋白抗体(CLA)试剂盒

PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 猪血管生成素2(ANG-2)试剂盒 进口分装

CLIAKitforADRA1A(Mouseadrenergicalpha-1Areceptor)ELISAKit小鼠能a1A受体

血液乙醇脱氢酶IV活性比色法定量试剂盒20次

MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)试剂盒

猪白介素1(IL-1)ELISAKit   ELISA. 

猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISAKit   ELISA. 

猪Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISAKit   ELISA. 

猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit   ELISA.

THPO重组小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签) Protein

ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈碱型乙酰受体M2(抗原)

ELK1重组人 ELK1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

AK2 Protein Human 重组人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 标签)

FGFR4 Protein Mouse 重组小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 标签)

CA12 Others Human 人 CA12 人细胞裂解液   真皮成纤维细胞Many   CD7 Others Human 人 CD7 人细胞裂解液   IGFBP5 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 标签) 小鼠原代子宫成纤维细胞 大鼠原代子宫内膜上皮细胞

大鼠骺软骨原代细胞胰淀素(IAPP)重组蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

ACVRL1 Protein Human 重组人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 标签)

TFPI重组人 TFPI 蛋白 (His 标签) Protein

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重组绿色小单孢菌 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 标签)

HA重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein