大鼠虹膜色素上皮原代细胞

大鼠虹膜色素上皮原代细胞

大鼠虹膜色素上皮细胞分离自眼球虹膜组织；虹膜是眼睛构造的一部分，属于眼球中层，位于血管膜的最前部；在睫状体前方虹膜，中心有一圆形开口，称为瞳孔，犹如相机当中可调整大小的光圈，内含色素决定眼睛的颜色。日间光线较为强烈时，虹膜会收蹜，只使一小束光线穿透瞳孔，进入眼睛；当进入黑暗环境中，虹膜就会往后退缩，使瞳孔变大，让更多的光线进入眼睛，多数的脊椎动物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮细胞（IPE）是虹膜重要结构组成细胞之一，位于虹膜组织的后面，和视网膜色素上皮细胞（RPE）同样起源于神经外胚叶层，可能具有相似的生物学功能，因此对IPE的研究将为防治因RPE结构或功能异常而导致的眼底病提供新思路。

产品名称：大鼠虹膜色素上皮细胞

组织来源：眼球

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠虹膜色素上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠虹膜色素上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 试剂盒

Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒

Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盘催乳素(HPL)试剂盒 进口分装

HumanChromogranin,CgA试剂盒人嗜铬蛋白A(CgA)试剂盒

总脂肪酶(lipase)定量试剂盒50次

Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)试剂盒

鱼脱酶1(DIO1)ELISA试剂盒 ELISA 组装/原装

Human ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)试剂盒

PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒 进口分装

ADVIgGIII腺病毒IgGⅢ型(间接法二步法)

血液乙醇脱氢酶III(谷胱苷肽-依赖性甲脱氢酶)活性比色法定量试剂盒20次

MouseSolubleEndoglin,ENG/sCD105ELISAKit小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)试剂盒

脂肪酸合成酶（FAS）测试盒   紫外分光光度法   50管/48样

蔗糖0酸化酶(SP)测试盒   紫外分光光度法   50管/48样

硫氧还蛋白氧化还原酶（xR）测试盒   可见分光光度法   50管/48样

还原酶（GR）测试盒   紫外分光光度法   50管/48样

CXCL13重组食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein

Morphine/BSA 与牛血清白蛋白偶联物 10mgMorphine/BSA 与牛血清白蛋白偶联物

DAPK3重组人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 标签) Protein

IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白

PREP Protein Mouse 重组小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白

CA1 Others Human 人 CA1 人细胞裂解液   小鼠上皮细胞   食管上皮细胞Many   子宫成纤维细胞Many   中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1  DCS 小鼠树突状细胞肉瘤细胞 小鼠原代子宫内膜干细胞 人原代内皮祖细胞

大鼠虹膜色素上皮原代细胞CD14(cluster of differentiation antigen 14 0.5mgCD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/内毒素受体抗原

ACYP2 Protein Human 重组人 ACYP2 / Acylphosphatase-2 蛋白 (GST 标签)

REN重组小鼠 REN1 / Renin-1 蛋白 (His 标签) Protein

SERPINE1 Protein Rat 重组大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 标签)

NAMPT重组人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白 (His & GST 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。