大鼠骨原代细胞

大鼠骨原代细胞

大鼠骨细胞分离自骨组织；骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内，其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞（Osteocyte）是人体骨骼中最主要的细胞成分。在成年人骨骼中，骨细胞占细胞总数量的90%～95%，大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形，位于基质构成的骨陷窝内。与神经细胞类似，每个骨细胞具有大量向外延伸的突触，而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触，骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流"。普遍认为，骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段，成骨细胞将可能有3种不同的归宿：分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程（凋亡）。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞，核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下，胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网，高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中，骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔，称为骨陷窝，其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液，骨细胞从中获得养分。

产品名称：大鼠骨细胞

组织来源：骨组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠骨采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠骨经骨钙素免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA 试剂盒

Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人B6(VB6)试剂盒

HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人胶原酶II(CollagenaseII)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanc-fos试剂盒人c-fos试剂盒规格：96T/48T

转基因玉米MON863品系基因定量试剂盒20次

Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人丝/苏蛋酸酶(STK)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)试剂盒 ，英文名： MMP-9 ELISA Kit

Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)试剂盒

MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干扰素(IFN-γ)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子6

细菌乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量试剂盒20次

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)试剂盒规格：96T/48T

人阻抑素(PHB)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human PHB (Prohibitin) ELISA Kit

人隐花色素1(CRY1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit

人优球蛋白(EL)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit

人信号素4D(SEMA4D)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit

IL8重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 标签) Protein

Ⅹ(F10)重组蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

EFNA4重组人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

ALOX5AP Protein Human 重组人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 标签)

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞)  人支气管平滑肌细胞HBSMC  MRC-5(人胚肺成纤维细胞 )     HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 鸭原代胚胎成纤维细胞 狗原代皮下微血管内皮细胞

大鼠骨原代细胞ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1 0.5mgECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 内皮素转化酶1抗原

ALPI Protein Human 重组人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白

CD226重组大鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白  Protein

MSR1 Protein Mouse 重组小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 蛋白 (His 标签)

CDC42BPB重组人 CDC42BPB 蛋白 (His & GST 标签) Protein