大鼠骨外膜原代细胞

大鼠骨外膜原代细胞

大鼠骨外膜细胞分离自骨外膜组织；骨外膜是指成骨细胞与破骨细胞紧贴骨密质外面包着的那层膜；在骨外膜和骨内膜中含有一种能够生成骨的细胞，称为成骨细胞，这种细胞具有使骨骼生长的功能。在骨外膜中还有另外一种专门破坏骨细胞的细胞，称为破骨细胞。这两种细胞作用相反又相互依据。成骨细胞像建筑工人，不停地生成新的骨组织，破骨细胞则像维修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨结构，并且还负责拆除“违章建筑"，就是除去不需要的多余的骨组织，从而使骨的整体结构更符合生物力学的需要。正常情况下，两种细胞之间处于动态的平衡之中，完成骨的生长发育的新陈代谢。骨折之后，成骨细胞首先启动，从而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢复了骨的连续性，往往不符合生物力学的需要，改建塑形的过程则必须有破骨细胞的参与才能完成。

产品名称：大鼠骨外膜细胞

组织来源：骨组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠骨外膜采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠骨外膜经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 试剂盒

Human vitamin A (VA) ELISA Kit 人A(VA)试剂盒

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HumancecropinB,CecB试剂盒人杀菌肽B(CecB)试剂盒规格：96T/48T

转基因玉米GA21品系试剂盒20次

HumanSerumamyloidP，SAPELISAKit人血清淀粉样蛋白P(SAP)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 大鼠溴脱氧核苷尿(BrdU)试剂盒

HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 人落叶型天疱疮抗体(PF)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancyclicadenosinemonophosphate,cAMP试剂盒人环0酸腺苷(cAMP)试剂盒规格：96T/48T

组织FES激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanProcalcitonin，PCTELISAKit人降钙素原(PCT)试剂盒规格：96T/48T

人组胺试剂盒   人组胺试剂盒   规格型号：96T/48T   人组胺试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人组胺试剂盒、人组胺试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人足细胞标记蛋白试剂盒   人足细胞标记蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人足细胞标记蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人足细胞标记蛋白试剂盒、人足细胞标记蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人总前列腺特异抗原试剂盒   人总前列腺特异抗原试剂盒   规格型号：96T/48T   人总前列腺特异抗原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人总前列腺特异抗原试剂盒、人总前列腺特异抗原试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人总胆汁酸试剂盒   人总胆汁酸试剂盒   规格型号：96T/48T   人总胆汁酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人总胆汁酸试剂盒、人总胆汁酸试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

ART4重组食蟹猴 ART4 蛋白 (His 标签) Protein

Integrin alpha 1 整合素α1抗原 0.5mgIntegrin alpha 1 整合素α1抗原

PIN1重组人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 (His 标签) Protein

AMIGO2 Protein Human 重组人 AMIGO2 蛋白 (His 标签)

LAIR1 Protein Mouse 重组小鼠 LAIR1 蛋白 (His 标签)

C2C12细胞，鼠肌原细胞 H08910(卵巢癌细胞) 大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1  METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   小鼠神经干细胞 小鼠骨骼肌肌肉母细胞，Sol8细胞 S-180 羊睾丸间质细胞永生化细胞 人原代膀胱癌相关成纤维细胞

大鼠骨外膜原代细胞Des(Desmin 0.5mgDes(Desmin) 结蛋白抗原

ALPI Protein Human 重组人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白 (His 标签)

TNFRSF13C重组大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 (His 标签) Protein

TNFRSF21 Protein Mouse 重组小鼠 DR6 / TNFRSF21 蛋白 (His 标签)

S100P重组人 S100P / S100E 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。