大鼠睾丸支持原代细胞

大鼠睾丸支持原代细胞

大鼠睾丸支持细胞分离自睾丸；睾丸支持细胞又称Sertoli细胞，在体内呈不规则的高锥体形，细胞基部附着在基膜上，顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架，为其提供必需的营养物质，能合成与分泌雄激素结合蛋白，为其提供高浓度的雄激素环境等，还具有构成血-睾屏障，形成睾丸内微环境，调节精子发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞，能分泌多种生长因子和免疫抑制因子，不仅可为精子提供营养支持和免疫保护，也能对其他细胞，如胰岛和神经细胞提供营养支持，而且当其与胰岛或神经细胞共移植时，也能够为这些细胞提供免疫保护，提高植活率。因此，睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值，而且在精子发生等领域有重要意义。

产品名称：大鼠睾丸支持细胞

组织来源：睾丸组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠睾丸支持采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠睾丸支持经Fas-L免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 试剂盒

Rat ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒

Humahioredoxieductase,xRELISAKit 人硫氧还蛋白还原酶(xR)试剂盒 进口分装

HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASP试剂盒人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)试剂盒

植物过氧化氢酶(CATALASE)过氧化活性比色法定量试剂盒20次

Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)试剂盒

猪S-100B蛋白(S-100B)试剂盒

Human epidermal baseme membrane aibody (EBMZ) ELISA Kit 人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)试剂盒

PorcineEpithelialgrowthfactor,EGFELISAKit 猪表皮生长因子(EGF)试剂盒 进口分装

CLIAKitforaGT(Mouseangiotensinogen)ELISAKit小鼠血管紧张素原

血液苹果酸脱氢酶(MDH)活性比色法定量试剂盒20次

Mouseoponi,Tn-TELISAKit小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)试剂盒

质粒大量提取试剂盒   5T

PlasmidMaxiKit   10T

质粒中量提取试剂盒   50T

PlasmidMidiKit   100T

EGFR重组人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein

脑源性神经营养因子(BDNF)重组蛋白 Recombinant Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)

GABARAP重组人 GABARAP / Apg8p1 蛋白 (His & MBP 标签) Protein

CDK4 Protein Human 重组人 CDK4 / CMM3 蛋白 (GST 标签)

NA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

BALB/3T3 clone A31细胞，小鼠胚胎成纤维细胞 L1210(白血病细胞) EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0901  FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人细胞裂解液   HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 羊原代胎盘绒毛膜滋养层细胞 兔原代成骨细胞

大鼠睾丸支持原代细胞Galanin 神经节肽 0.5mgGalanin 神经节肽

AGER Protein Human 重组人 AGER / RAGE 蛋白

BST1重组大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (His 标签) Protein

SLAMF8 Protein Mouse 重组小鼠 SLAMF8 / BLAME 蛋白 (His 标签)

CXCL1重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。