大鼠肝外胆管上皮原代细胞

大鼠肝外胆管上皮原代细胞

大鼠肝外胆管上皮细胞分离自肝外胆管组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。临床上常见的胆管病变如胆道闭锁、先天性胆总管囊肿、原发性硬化性胆管炎等，都是以胆管上皮细胞为病变的靶位，引起胆管上皮的损伤。了解正常胆管上皮细胞的生物学特征和病变胆管上皮细胞的病理生理学特征对研究胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。

产品名称：大鼠肝外胆管上皮细胞

组织来源：胆管组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

方法简介

普诺赛实验室分离的大鼠肝外胆管上皮采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

普诺赛实验室分离的大鼠肝外胆管上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISA 试剂盒

Rat ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)试剂盒

HumanCailageglycoprotein39,HCgp-39ELISAKit 人软骨糖蛋白39(HCgp-39)试剂盒 进口分装

HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1Ab试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)试剂盒

植物谷氨酰半胱合成酶(glamylsysteinesyhetase)活性比色法定量试剂盒20次

Humanβ-glucuronidase，βGDELISAKit人β葡萄糖酸苷酶(βGD)试剂盒

猪α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒

Human ai albumin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗白蛋白抗体(AAA)试剂盒

PorcineIerleukin6,IL-6ELISAKit 猪白介素6(IL-6)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAHA(Humanai-Histoneaibody)ELISAKit人抗组蛋白抗体

血液牛病毒性腹泻病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR扩增试剂盒20次

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKit小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒

植物硝态氮测试盒   可见分光光度法   50管/48样

土壤铵态氮测试盒   可见分光光度法   50管/48样

土壤硝态氮测试盒   可见分光光度法   50管/48样

植物态氮测试盒   可见分光光度法   50管/48样

AIMP1重组小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 Protein

凋亡相关因子(FAS)重组蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis (FAS)

KCNIP3重组人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 Protein

IL3 Protein Human 重组人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白

LTBR Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (Fc 标签)

BABL/C2 BABL/C小鼠胚胎细胞  大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1 神经上皮瘤细胞，SK-N-MC细胞 MPC细胞，小鼠垂体细胞  IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   SELL Others Human 羊原代主动脉平滑肌细胞 大鼠原代结肠成纤维细胞

大鼠肝外胆管上皮原代细胞Connexin-45(CX45 0.5mgConnexin-45(CX45) 间隙连接蛋白45(抗原)

ADSL Protein Human 重组人 ADSL / Adenylosuccinate Lyase 蛋白 (His 标签)

CD4重组大鼠 CD4 蛋白 (His 标签) Protein

FCGR1 Protein Mouse 重组小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His 标签)

ULBP2重组人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白  Protein