大鼠肝实质原代细胞

大鼠肝实质原代细胞

大鼠肝实质细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞是指具有肝功能的单位，是肝脏的基本组成单位之一。肝实质细胞与主要病生理变化：急性肝炎、肝硬化、肝脓肿。肝实质细胞属于中高度分化细胞，生长营养需求高，在体外存活时间短；细胞呈圆形或多角形，核大而圆，居中，常染色质丰富，部分有双核或多倍体核。肝脏作为体内重要的器官，在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的作用。

产品名称：大鼠肝实质细胞

组织来源：肝脏组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠肝实质采用混合酶灌流消化、反复低速离心制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肝实质经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA 试剂盒

Rat aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 大鼠抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)试剂盒

HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit 人不透光相关蛋白(OPAs)试剂盒 进口分装

HumanAngiotensinconveingenzyme,ACE试剂盒人血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒

植物高质化线粒体分离试剂盒10次

Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme1，1BACE1ELISAKit人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)试剂盒

猪α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒

Human ai murine typhus aibody (ai-typhus-Ab) ELISA Kit 人抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)试剂盒

Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit 猪白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAgIa(HumanangiotensinIIreceptoypeIa)ELISAKit人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型

血液牛病毒性腹泻病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定性试剂盒20次

MouseypsinELISAKit小鼠(ypsin)试剂盒

植物血凝素   5mg

Lectin,fromArachisHypogaea(pean)

植物血凝素   5mg

Lectin,fromiticumvulgaris

HA重组甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

SHP2 peptide 蛋白酪0酸酶2抗原 0.5mgSHP2 peptide 蛋白酪0酸酶2抗原

MAPK1重组人 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (GST 标签) Protein

IL31 Protein Human 重组人 IL-31 / IL31 蛋白

LAYN Protein Human 重组人 Layilin / LAYN 蛋白

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞 Mouse  大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3 结肠腺癌细胞，CW-2细胞 R1610细胞，中国仓鼠仓鼠肺细胞  人细胞;Hela  C6-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)大鼠脑胶质瘤细胞 C6-EGFP-puro (leiviral 羊原代子宫内膜上皮细胞 小鼠原代卵巢间质细胞

大鼠肝实质原代细胞reMOG 1-125 protein 重组髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白1-125 500ugreMOG 1-125 protein 重组髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白1-125

ADPRH Protein Human 重组人 ADPRH / ARH1 蛋白 (His 标签)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

CSF3 Protein Human 重组人 G-CSF / CSF3 蛋白

IL12A重组人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。