大鼠肝非实质原代细胞

大鼠肝非实质原代细胞

大鼠肝非实质细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞具有肝功能的单位，是肝脏的基本组成单位之一。肝非实质细胞是指除了肝实质细胞之外的细胞，主要包含了肝窦内皮细胞、肝星状细胞、肝枯否细胞。

产品名称：大鼠肝非实质细胞

组织来源：肝

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：悬浮

细胞形态：圆形

传代特性：不增殖；不传代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠肝非实质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。

方法简介

实验室分离的大鼠肝非实质采用取肝脏灌流、胶原酶消化、密度梯度离心法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠肝非实质经过检测，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA 试剂盒

Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)试剂盒

Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞浆免疫球蛋白(CIg)试剂盒 进口分装

HumanAngiopoietin2,ANG-2试剂盒人血管生成素2(ANG-2)试剂盒

植物脯羟化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量试剂盒20次

Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)试剂盒

猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA 试剂盒

Human ai proteinase 3 aibody IgG (PR3 Ab-IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3 Ab-IgG)试剂盒

Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 猪肝细胞生长因子(HGF)试剂盒 进口分装

CLIAKitfora-Glu(MouseAlpha-Glucosidase)ELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶

血液乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量试剂盒20次

Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit小鼠转化生长因子α(TGF-α)试剂盒

植物D2(VD2)ELISAKit   ELISA. 

植物D3(VD3)ELISAKit   ELISA. 

植物D(VD)ELISAKit   ELISA. 

植物B6(VB6)ELISAKit   ELISA.

CNTN3重组大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 标签) Protein

FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 脑型脂肪酸结合蛋白抗原

VSIG2重组人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein

CGB7 Protein Human 重组人 CGB7 蛋白

DDR2 Protein Mouse 重组小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人细胞裂解液   EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人细胞裂解液   恒河猴肾细胞;RM-3  雪旺细胞SCM-prf  CL-0155ME-180( 永生化细胞 人原代肺微血管周细胞

大鼠肝非实质原代细胞铜蓝蛋白(CP)重组蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)

AGO1 Protein Human 重组人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 标签)

MERTK重组人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

RPN2重组人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。