大鼠肺小动脉平滑肌原代细胞

大鼠肺小动脉平滑肌原代细胞

大鼠肺小动脉平滑肌细胞分离自肺小动脉组织；小动脉（smallartery），管径在0.3～1mm之间，小动脉包括粗细不等的几级分支，也属肌性动脉。较大的小动脉，内膜有明显的内弹性膜，中膜有几层平滑肌，外膜厚度与中膜相近，一般没有外弹性膜。小动脉是决定周围循环阻力大小的主要因素，也是调节微循环灌注量的“总开关"。典型的小动脉，其管壁的厚度与管径相比约为1∶2。中膜的肌层相对比其他动脉为厚，当平滑肌在神经支配下强力收缩时，其管腔可以闭塞，而使血液不能流入它所分布的毛细血管内，从而增加了周围血液循环的阻力。如果有许多小动脉同时收缩，可使血压显著上升。反之，当小动脉的平滑肌舒张时，则可使大量的血液流入毛细血管，外周阻力明显下降，血压降低。终末小动脉（terminal arteri-ole）的口径为20～30μm；后小动脉（metar-teriole），又称毛细血管前小动脉（precapil-lary arteriole）的口径为12～15μm。管壁内均有较稀疏的平滑肌，在毛细血管前小动脉分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚，叫做毛细血管前括约肌（precapillary sphinc-ter），其收缩或舒张，可调节真毛细血管的血流量，是调节微循环灌注量的“分开关"。

产品名称：大鼠肺小动脉平滑肌细胞

组织来源：肺小动脉组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次；

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌采用蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠酶2(CA-2)ELISA 试剂盒

Rat activated protein C (APC) ELISA Kit 大鼠活化蛋白C(APC)试剂盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)试剂盒 进口分装

Cobravenomfactor,CVF试剂盒毒蛇因子(CVF)试剂盒

载玻片细胞钙ATP酶SERCA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseendotoxin,ETELISAKit小鼠内毒素(ET)试剂盒

猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA 试剂盒

Human single sanded DNA aibody / denatured DNA aibody (ssDNA) ELISA Kit 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)试剂盒

PorcineIerferonγ,IFN-γELISAKit 猪γ干扰素(IFN-γ)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAg-NORs(HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins)ELISAKit人核仁形成区嗜银蛋白

血液乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量试剂盒20次

MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒

猪白介素1β(IL-1β)ELISAKit   ELISA. 

猪白介素18(IL-18)ELISAKit   ELISA. 

猪白血病抑制因子受体(LIFR)ELISAKit   ELISA.

HA重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein

PDGF-BB peptide 血小板源性生长因子-BB抗原 0.5mgPDGF-BB peptide 血小板源性生长因子-BB抗原

IFNAR2重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白  Protein

AGA Protein Human 重组人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 (His 标签)

CCL1 Protein Human 重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白

AGS人胃腺癌细胞 Human  EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8  叙利亚仓鼠肌肉细胞;GH-M1  EC871214细胞，人食管癌细胞 人脑瘤细胞,SF763细胞 中国仓鼠卵巢细胞;TPO-CHO-I  小鼠腹脊髓神经细胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 猪原代B淋巴细胞 兔原代脂肪细胞

大鼠肺小动脉平滑肌原代细胞TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 坏死因子受体相关因子2抗原

ACTR3 Protein Human 重组人 ACTR3 蛋白 (His & GST 标签)

BMP2重组斑马鱼 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TFPI Protein Human 重组人 TFPI 蛋白 (His 标签)

ACVRL1重组人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 标签) Protein