大鼠肺泡巨噬原代细胞

大鼠肺泡巨噬原代细胞

大鼠肺泡巨噬细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管，它们的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即为肺泡。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2-3周，多用做原代培养，难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。肺泡巨噬细胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活跃，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬细胞储存器官，为结核病的研究提供了重要的材料。

产品名称：大鼠肺泡巨噬细胞

组织来源：肺组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 巨噬细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 （12mM）

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠肺泡巨噬采用PBS灌注结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肺泡巨噬经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA 试剂盒

Rat basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 大鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)试剂盒

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正常女性人体肝组织S9组分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)试剂盒

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Human chondroitin sulfate (CS) ELISA Kit 人软骨素(CS)试剂盒

HumanMannoseELISAKit 人甘露糖(Mannose)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2试剂盒鸡转化生长因子β2(TGF-β2)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞RyR受体蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseesogen,EELISAKit小鼠雌激素(E)试剂盒规格：96T/48T

脂肪酶（LPS）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

醇脱氢酶（ADH）试剂盒   紫外分光光度法    50管/48样

脂氧合酶（LOX）试剂盒   紫外分光光度法    50管/48样

酰基转移酶（AAT）试剂盒   可见分光光度法   10管/9样

CD4重组大鼠 CD4 蛋白 (His 标签) Protein

Connexin-45(CX45 0.5mgConnexin-45(CX45) 间隙连接蛋白45(抗原)

ULBP2重组人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白  Protein

ADSL Protein Human 重组人 ADSL / Adenylosuccinate Lyase 蛋白 (His 标签)

FCGR1 Protein Mouse 重组小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His 标签)

ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 人细胞裂解液   NAMALWA(人Butt's淋巴瘤细胞)     IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人细胞裂解液   PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 猪原代肺成纤维细胞 小鼠原代髓核细胞

大鼠肺泡巨噬原代细胞Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉样肽31-35(多肽蛋白)

ACPP Protein Human 重组人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 标签)

CADM3重组小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 标签) Protein

LIFR Protein Rat 重组大鼠 LIFR 蛋白 (His 标签)

TXNL4B重组人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 标签) Protein