大鼠肺大静脉内皮原代细胞

大鼠肺大静脉内皮原代细胞

大鼠肺大静脉内皮细胞分离自肺大静脉组织；肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中，把动脉血由肺送回心脏的静脉，是一个静脉里流动脉血的血管。左右1对，共4条，两条连接右肺，两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接，而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压，是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下，肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点，肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力，要维持肺循环的低压、低阻的状态，必须保证整个肺循环系统的畅通无阻，血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉，再入左心室，经过左心室收缩进入体循环，才能避免肺动脉内压力升高。细胞呈多边形鹅卵石状排列；该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。

产品名称：大鼠肺大静脉内皮细胞

组织来源：肺静脉组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠肺大静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肺大静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA 试剂盒

Prothrombin fragme F1+2 (F1+2) ELISA Kit 人原片段F1+2(F1+2)试剂盒

HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 人抗胶原蛋白抗体(CLA)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG试剂盒人1,3-二0酸甘油酸(1,3-DPG)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞线粒体粗提分离试剂盒10次

MouseAzidothymidine,AZTELISAKit小鼠(AZT)试剂盒规格：96T/48T

植物过氧化物酶(POD)试剂盒

Human ai ribosomal P protein aibody (ARPA/Rib-P) ELISA Kit 人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)试剂盒

PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 猪载脂蛋白A1(apo-A1)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAECA(Mouseai-endothelialcellaibody)ELISAKit小鼠抗内皮细胞抗体

血液氧化型(GSSG)浓度高效液相色谱定量试剂盒50次

MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)试剂盒

脂多糖   10mg

Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5

L-异亮酸   10g

L-Isoleucine   50g

IFNAR1重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein

IL-5 peptide 白细胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白细胞介素5抗原

CNTF重组人 CNTF 蛋白 (His 标签) Protein

AIF1 Protein Human 重组人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 标签)

DDR1 Protein Mouse 重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

ACVR1C Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 人细胞裂解液   人颅骨造骨细胞 (HCO) NRK-52E，大鼠肾细胞 Rattus  MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞  中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 猪原代骨髓间充质干细胞 大鼠原代肺大动脉外膜成纤维细胞

大鼠肺大静脉内皮原代细胞FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素结合生长因子( 酸性成纤维细胞生长因子)(多肽片断抗原)

IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白

CD79B重组大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein

EFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)

CCL17重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。