大鼠腓肠肌原代细胞

大鼠腓肠肌原代细胞

大鼠腓肠肌细胞分离自小腿肌肉组织；腓肠肌位于小腿后面的皮下，是一个浅表的肌肉，当人体站立时，可以在小腿后面看到隆起肌肉的轮廓就是腓肠肌。腓肠肌为小腿后侧群浅组肌肉，有内、外二头，内侧头起自股骨内侧髁上的三角形隆起，外侧头起自股骨外侧髁的近侧端，在二头的深面各有一滑膜囊。腓肠肌的二肌腹增大，在腘窝下角彼此邻近，所成夹角多为25°～30°，此肌下行与比目鱼肌移行为跟腱，止于跟骨结节。腓肠肌的动脉发自腘动脉、静脉与动脉伴行，注入腘静脉或小隐静脉。腓肠肌的神经全部来自胫神经。包括内、外侧肌神经。腓肠肌在行走及站立时能提足跟向上，直立时，腓肠肌和比目鱼肌都参加强固膝关节，并调节小腿和足的位置。胫前皮肤缺损或深部窦道及瘢痕，可以切取腓肠肌内侧头及其皮面皮肤所形成的肌皮瓣向前旋转。腓肠肌还可影响足的纵弓，该肌瘫痪或时，足纵弓将加深。该肌由胫神经支配，股骨髁上骨折时，因腓肠肌收缩远侧端常自后移位。腓肠肌是胫骨和腓骨后面的一块肌肉。腓肠肌细胞属于骨骼肌细胞的一种，骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

产品名称：大鼠腓肠肌细胞

组织来源：骨骼肌组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠腓肠肌采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠腓肠肌经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA 试剂盒

Human urokinase (UK) ELISA Kit 人(UK)试剂盒

HumanoligomericproteinELISAKit 人寡聚蛋白(oligomeric)试剂盒 96T/48T 进口分装

GuineaPiglipidperoxlde,LPO试剂盒豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞高质化线粒体分离试剂盒10次

MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit小鼠溴脱氧核苷尿(BrdU)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)试剂盒E

Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK试剂盒人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)试剂盒规格：96T/48T

组织EPHB4激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanProgesterone，PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)试剂盒规格：96T/48T

人周期素依赖性激酶9(CDK-9)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit

人周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit

人轴突生长诱向因子1(n1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human n1 (Nein 1) ELISA Kit

人轴突生长诱向因子4(n4)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human n4 (Nein 4) ELISA Kit

CD2重组大鼠 CD2 蛋白  Protein

Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1 0.5mgFut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 阶段特异性胚胎表面抗原-1抗原

PARK7重组人 PARK7 / DJ-1 蛋白 (His 标签) Protein

AMPK Protein Human 重组人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白

ICAM2 Protein Mouse 重组小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白

ACHN, 人肾细胞腺癌细胞 Human  NOV Protein Canine 重组狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签)  非洲绿猴肾细胞;VERO  LTEP-a-2细胞，人肺腺癌细胞 猴肾细胞系,VERO E6细胞 CM-M050小鼠卵巢颗粒细胞大鼠脑胶质瘤细胞;C6 猪原代卵巢内膜细胞 兔原代眼外肌成纤维细胞

大鼠腓肠肌原代细胞蛋白激酶Cδ(PKCδ)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 标签) Protein

FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 标签)

AHSP重组人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。