大鼠成骨原代细胞

大鼠成骨原代细胞

大鼠成骨细胞分离自颅骨组织；颅骨位于脊柱上方，由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外，其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结，起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部，内有颅腔，容纳脑，共8块。面颅为颅的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等结构，构成面部的支架，共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞，负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建，骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨；破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础，也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。

产品名称：大鼠成骨细胞

组织来源：颅骨组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠成骨采用先用短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠成骨经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠三腺原酸(T3)试剂盒

People in morphine peptide -2 (EM-2) ELISA Kit 人内吗非肽-2(EM-2)试剂盒

Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISAKit 人淀粉样前体蛋白(βAPP)试剂盒 96T/48T 进口分装

GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEs试剂盒豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性荧光定量试剂盒20次

Mousec-junELISAKit小鼠c-jun试剂盒规格：96T/48T

豚鼠胆囊收缩素/肠促肽(CCK)试剂盒 ，英文名： CCK ELISA Kit

Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受体(D2R)试剂盒

Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子酯转移蛋白(CETP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白

细菌铜ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量试剂盒20次

rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)试剂盒规格：96T/48T

人总铁结合力（TIBC）试剂盒   96T/48T

人总前列腺特异抗原(tPSA)试剂盒   96T/48T

人总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒   96T/48T

人总蛋白（TP）试剂盒   96T/48T

BMP2重组斑马鱼 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 坏死因子受体相关因子2抗原

ACVRL1重组人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 标签) Protein

ACTR3 Protein Human 重组人 ACTR3 蛋白 (His & GST 标签)

TFPI Protein Human 重组人 TFPI 蛋白 (His 标签)

A498细胞，人肾癌细胞系 蝙蝠肺细胞,Tb 1 Lu细胞 CL-0430RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)  Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴细胞白血病细胞)     HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞 小鼠成纤维细胞， 猪原代气管上皮细胞 人原代脑血管周细胞

大鼠成骨原代细胞phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原

CEP57 Protein Human 重组人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 标签)

NA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神经酶 (Neuraminidase / NA) Protein

PF4 Protein Human 重组人 CXCL4 / PF4 蛋白

EGFR重组人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。