大鼠肠微血管内皮原代细胞

大鼠肠微血管内皮原代细胞

大鼠肠微血管内皮细胞分离自肠道组织；肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。微血管是极细微的血管，管径平均为6-9μm，连于动、静脉之间，互相连接成网状。微血管壁薄，管径较小，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。其管壁主要由一层内皮细胞构成，在内皮外面有一薄层结缔组织。另外还常可见到一种扁而有突起的细胞贴在微血管的管壁外面，称为周细胞。

产品名称：大鼠肠微血管内皮细胞

组织来源：肠组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠肠微血管内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肠微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

小鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA 试剂盒

Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)试剂盒

Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用转录复合体(GTC)试剂盒 进口分装

Deererythrocytemembraneprotein,EMP试剂盒红细胞膜蛋白(EMP)试剂盒

载玻片细胞脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠内皮型合成酶(eNOS)试剂盒

豚鼠坏死因子α(TNF-α)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human peosidine ELISA Kit (Peosidine) 人戊糖素(Peosidine)试剂盒

HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 人β内啡肽受体(β-EPR)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTP试剂盒人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)试剂盒规格：96T/48T

组织D-葡萄糖激酶法定量试剂盒20次

HumanProstaglandinE2，PG-E2ELISAKit人前列腺素E2(PGE2)试剂盒规格：96T/48T

小鼠髓过氧化物酶   英文名称：   Mouse Myeloperoxidase   规格：      英文缩写：   MPO

小鼠巨噬细胞趋化蛋白-1   英文名称：   monocyte chemotactic protein 1   规格：      英文缩写：   MCP-1

小鼠巨噬细胞趋化蛋白-3   英文名称：   monocyte chemotactic protein 3   规格：      英文缩写：   MCP-3

小鼠M-能受体结合力   英文名称：   M—cholinoceptor binding capacity   规格：      英文缩写：   MCBC

IL22RA1重组狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein

NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神经元素3抗原

ADRBK1重组人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CDH2 Protein Human 重组人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 标签)

FABP4 Protein Mouse 重组小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白

A-375[A375]细胞，恶性黑色素瘤细胞 白血病细胞,Jurk. Clone E6-1细胞 人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431]  MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞)     SW-13细胞，肾上腺皮质腺癌细胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma细胞 猪原代乳腺上皮细胞 小鼠原代颌下腺上皮细胞

大鼠肠微血管内皮原代细胞BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形态发生蛋白4(抗原)

CFD Protein Human 重组人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

PRLR重组小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CSF2RB Protein Rat 重组大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 标签)

KIT重组人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 标签) Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。