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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的大鼠肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠肠黏膜上皮原代细胞 | 组织来源 | 肠组织 |
英文名称 | Rat Intestinal Mucosal Epithelial Cells | 货号 | YS-01X7123 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
大鼠肠黏膜上皮细胞分离自肠道组织；肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
公司产品：
小鼠脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒
One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型脑抗体IgG(JE IgG)试剂盒
HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B细胞受体(BCR)试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB试剂盒鸡核因子κB(NF-κB)试剂盒规格：96T/48T
载玻片细胞P38蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次
mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)试剂盒规格：96T/48T
小鼠胃泌素(Gas)试剂盒 96T/48T
Human phosphatidylinositol aibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgM) ELISA Kit 人0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)试剂盒
HumanElastaseELISAKit 人弹性蛋白酶(Elastase)试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenIerleukin18,IL-18试剂盒鸡白介素18(IL-18)试剂盒规格：96T/48T
载玻片细胞GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次
MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)试剂盒规格：96T/48T
猪α干扰素试剂盒 猪α干扰素试剂盒 规格型号：96T/48T 猪α干扰素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪α干扰素试剂盒、猪α干扰素eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
猪白介素10试剂盒 猪白介素10试剂盒 规格型号：96T/48T 猪白介素10试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪白介素10试剂盒、猪白介素10eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒 猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒 规格型号：96T/48T 猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒、猪B细胞淋巴瘤因子2eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒 猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒 规格型号：96T/48T 猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒、猪Bcl-2相关X蛋白eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
HAVCR2重组小鼠 TIM3 / HAVCR2 蛋白 Protein
核糖体蛋白L23A(RPL23A)重组蛋白 Recombinant Ribosomal Protein L23A (RPL23A)
TMED4重组人 TMED4 / ERS25 蛋白 (His 标签) Protein
ACRV1 Protein Human 重组人 SP-10 / ACRV1 蛋白 (His 标签)
ANGPTL7 Protein Canine 重组狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 标签)
A2M Others Human 人 A2M / CPAMD5 / Alpha-2-macroglobulin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) 猪原代肾小管上皮细胞 兔原代脊髓成纤维细胞
大鼠肠黏膜上皮原代细胞LOX-1/OLR1 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体 0.5mgLOX-1/OLR1 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体
AARSD1 Protein Human 重组人 AARSD1 蛋白 (His 标签)
REG1B重组食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (His 标签) Protein
KLK11 Protein Mouse 重组小鼠 KLK11 / Kallikrein-11 蛋白 (His 标签)
KLK8重组人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 (His 标签) Protein
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