大鼠肠巨噬原代细胞

大鼠肠巨噬原代细胞

大鼠肠巨噬细胞分离自肠道组织；肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。巨噬细胞属于免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2-3周，多用做原代培养，难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。

产品名称：大鼠肠巨噬细胞

组织来源：肠组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 巨噬细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 （12mM）

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠肠巨噬采用酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肠巨噬经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA 试剂盒

Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)试剂盒

HumanactivatedproteinC,APCELISAKit 人活化蛋白C(APC)试剂盒 进口分装

Chickenniicoxide,NO试剂盒鸡(NO)试剂盒

载玻片细胞P35蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)试剂盒

小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)试剂盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)试剂盒 96T/48T 进口分装

cit瓜规格：96T/48T

载玻片细胞钙ATP酶PMCA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)试剂盒规格：96T/48T

腮腺病毒(MuV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

麻风杆菌(ML)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

普氏立克次体(RP)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

莫氏立克次体(RM)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

ACE2重组食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 猪胰岛素

TLK1重组人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 标签) Protein

IL18 Protein Human 重组人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 标签)

IL36B Protein Mouse 重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

A-204细胞，人横纹肌肉瘤细胞 两歧双歧杆菌 人肝永生化细胞;THLE-3  F81(猫细胞)     人羊膜间充质基质细胞 Sars蛋白表达株，293001A细胞 NCI-H596 [H596](人肺癌细胞)  CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐药细胞亚株) 猪原代肾小球系膜细胞 大鼠原代胎盘间充质干细胞

大鼠肠巨噬原代细胞Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor 0.5mgKiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 转移抑制基因(抗原)

ABHD10 Protein Human 重组人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 标签)

IL2RA重组食蟹猴 IL2RA 蛋白 (His 标签) Protein

EGFR Protein Mouse 重组小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

CDON重组人 CDON / CDO 蛋白 (His 标签) Protein