详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的大鼠肠动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠肠动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠肠动脉内皮原代细胞 | 组织来源 | 肠组织 |
英文名称 | Rat Intestinal Artery Endothelial Cells | 货号 | YS-01X7127 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
大鼠肠动脉内皮细胞分离自肠动脉;肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
公司产品:
小鼠血清(NO)ELISA 试剂盒
One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)试剂盒
Humanβ-lactamaseELISAKit 人β内酰胺酶(β-lactamase)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相关X蛋白
荧光稳定/稀释溶液10毫升
MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)试剂盒规格:96T/48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 ,英文名: IgA ELISA Kit
Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧诱导因子1α(HIF-1α)试剂盒
Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白
细菌柠檬酸利用试剂盒20次
rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)试剂盒规格:96T/48T
鱼类释放激素试剂盒 鱼类释放激素试剂盒 规格型号:96T/48T 鱼类释放激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:鱼类释放激素试剂盒、鱼类释放激素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
鱼类白介素1α试剂盒 鱼类白介素1α试剂盒 规格型号:96T/48T 鱼类白介素1α试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:鱼类白介素1α试剂盒、鱼类白介素1αeisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
鱼促上腺皮质激素试剂盒 鱼促上腺皮质激素试剂盒 规格型号:96T/48T 鱼促上腺皮质激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:鱼促上腺皮质激素试剂盒、鱼促上腺皮质激素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
猪甘油三酯试剂盒 猪甘油三酯试剂盒 规格型号:96T/48T 猪甘油三酯试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:猪甘油三酯试剂盒、猪甘油三酯eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
CD79B重组大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein
FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素结合生长因子( 酸性成纤维细胞生长因子)(多肽片断抗原)
CCL17重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein
IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白
EFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
786-O[786-0]细胞,肾透明细胞腺癌细胞 单核细胞白血病细胞,J-111细胞 人小细胞肺癌细胞;NCI-H209 视网膜微血管内皮细胞Many U-2 OS细胞,骨肉瘤细胞 人细胞系,KMB-17细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3 猪原代小肠黏膜上皮细胞 小鼠原代破骨细胞
大鼠肠动脉内皮原代细胞Cyclin D3(C-term 0.5mgCyclin D3(C-term) 周期素D3抗原
ACVR1 Protein Human 重组人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (His 标签)
TDGF1重组大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签) Protein
CD200R4 Protein Mouse 重组小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 (His 标签)
FABP6重组人 FABP6 / I-BABP 蛋白 Protein