大鼠肠道干原代细胞

大鼠肠道干原代细胞

大鼠肠道干细胞分离自肠道组织；肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。肠道干细胞（ISC）也称肠道上皮干细胞，主要位于肠黏膜隐窝内，其与肠道黏膜上皮的更新和修复密切相关。正常情况下，位于隐窝基底部的肠道干细胞不断向隐窝顶部（肠腔方向）迁移，整个迁移过程大约3-5d，在迁移过程中肠道干细胞分化形成不同的肠黏膜细胞。当受到外界生理或病理信号作用时，ISC可持续增殖、分化为成熟肠上皮细胞，如肠型细胞、杯状细胞、内分泌细胞和潘氏细胞等，从而维持肠道黏膜结构和功能的稳定性。

产品名称：大鼠肠道干细胞

组织来源：肠组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 球形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠肠道干采用-胶原酶联合消化后，用肠道干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肠道干经MSI-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA 试剂盒

Human tyrosine kinase 2 (Tyk-2) ELISA Kit 人酪激酶2(Tyk-2)试剂盒

Humanβ-galactosidase,βGALELISAKit 人β半乳糖苷酶(βGAL)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor(DC-SIGN/CD209)ELISAKit大鼠树突状细胞表面特异性C型凝集素-细胞间黏附分子3结合非整合素分子

荧光定量分析20样本

MouseIerleukin1α,IL-1αELISAKit小鼠白介素1α(IL-1α)试剂盒规格：96T/48T

小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human keratan sulfate (KS) ELISA Kit 人角质素(KS)试剂盒

Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit 人非甲基化寡核苷酸(NON)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgA试剂盒鸡分泌型免疫球蛋白A(SIgA)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞PARP蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纤连蛋白(FN)试剂盒规格：96T/48T

鱼类状腺原酸(T3)试剂盒     试剂盒   组装/原装

鱼类(Coisol)试剂盒     试剂盒   组装/原装

鱼类甲状腺素(T4)试剂盒     试剂盒   组装/原装

鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒     试剂盒   组装/原装

IL18R1重组小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一种原癌基因)抗原

CSF2重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

IL36B Protein Human 重组人 IL36B / IL1F8 蛋白

FSTL3 Protein Mouse 重组小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

6T-CEM人T细胞白血病细胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS  Neuro-2a/N2a(小鼠脑神经瘤细胞)  中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 猪原代心肌成纤维细胞 大鼠原代角质形成细胞

大鼠肠道干原代细胞ER-Alpha peptide 雌激素受体(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受体(多肽抗原)

ADAM15 Protein Human 重组人 ADAM15 蛋白 (His 标签)

CD164重组大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白  Protein

ADIPOQ Protein Mouse 重组小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 标签)

PRSS27重组人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 标签) Protein