大鼠表皮角化上皮原代细胞

大鼠表皮角化上皮原代细胞

大鼠表皮角化细胞分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角化细胞（KC）是构成表皮的主要细胞成分，在体内处于不断增殖过程中，分裂的角化细胞主要位于其基底层，少数位于棘细胞层。随着向表层的推移，细胞的分化程度逐渐增加，并丧失分裂活性。

产品名称：大鼠表皮角化上皮细胞

组织来源：皮肤组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-3代左右；2代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠表皮角化上皮细胞先蛋白酶消化、后-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠表皮角化上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

小鼠氧还原蛋白过氧化物酶4(PRDX4)试剂盒

Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)试剂盒

Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶

饮料比色法定量试剂盒20次

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)试剂盒规格：96T/48T

小鼠脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒 96T/48T

One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型脑抗体IgG(JE IgG)试剂盒

HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B细胞受体(BCR)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB试剂盒鸡核因子κB(NF-κB)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞P38蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)试剂盒规格：96T/48T

植物草酸氧化酶(OxO)试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物25羟基D3(25(OH)D3/25HVD3)试剂盒     试剂盒   组装/原装

鱼脱酶3（DIO3）ELISA试剂盒     ELISA   组装/原装

鱼脱酶2（DIO2）ELISA试剂盒     ELISA   组装/原装

DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 标签) Protein

蛋白激酶Cδ(PKCδ)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

AHSP重组人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 标签)

5E Others Rat 大鼠 CD73 / 5E 人细胞裂解液   SMC-1(人胸膜瘤细胞)  胃黏膜上皮Many   CL-0233THP-1(人髓系白血病单核细胞) 猪原代胰腺腺泡上皮细胞 大鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞

大鼠表皮角化上皮原代细胞趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)

ABL1 Protein Human 重组人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 标签)

DLL4重组人 DLL4 蛋白  Protein

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

MMP12重组人 MMP12 / MMP-12 / HME 蛋白 (catalytic domain) Protein