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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的大鼠鼻黏膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的大鼠鼻黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠鼻黏膜上皮原代细胞 | 组织来源 | 鼻黏膜 |
英文名称 | Rat Nasal Mucosal Epithelial Cells | 货号 | YS-01X8220 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
大鼠鼻黏膜上皮细胞分离自鼻黏膜组织；黏膜是覆盖在机体内消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔内壁的一层组织结构，由上皮组织和疏松结缔组织构成。根据部位不同，有口腔黏膜、胃肠黏膜、鼻腔黏膜、气管黏膜、阴道黏膜、眼睑黏膜等不同名称。它们的结构也因功能、部位不一而不尽相同。鼻腔黏膜，简称鼻黏膜，覆盖于鼻腔表面，黏膜下方为软骨、骨或骨骼肌。根据结构与功能的不同，鼻黏膜又分为前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是邻近外鼻孔的部分，有丰富的鼻毛可以阻挡空气中较大的尘粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部，有发达的上皮纤毛，它们可向咽部摆动，黏着有尘粒、细菌的黏液排向咽部，最终将它们排出体外。此外，此部分有丰富的血管与腺体，对吸入的空气有加温和湿润作用。嗅部黏膜范围较小，主要位于鼻腔顶部。它含有一种专司嗅觉的嗅细胞及嗅腺，它们分泌能溶解到达嗅区的含气味的微粒，刺激嗅细胞表面上的嗅毛产生嗅觉，而且还由于嗅细胞具有不同的受体，可分别接受不同化学分子的刺激，因此可产生不同的嗅觉。
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠鼻黏膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 试剂盒
Human anspoer associated with aigen processing (TAP) ELISA Kit 人抗原处理相关转运蛋白(TAP)试剂盒
Humahymusindependeaigen,TI-AgELISAKit 人非依赖性抗原(TI-Ag)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforAAA(Humanai-Actinaibody)ELISAKit人抗肌动蛋白抗体
胰腺脂酶活性比色法定量试剂盒20次
Mouseneurofilameprotein,NFELISAKit小鼠神经丝蛋白(NF)试剂盒规格：96T/48T
植物E(VE)ELISA 试剂盒
Human liver specific lipoprotein aibody (LSP) ELISA Kit 人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)试剂盒
PorcineCoicosterone,COELISAKit 猪皮质酮/肾上腺酮(CO)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAFP-L1(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1)ELISAKit人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1
血液D比色法定量试剂盒20次
MouseThromboxaneB2,TXB2ELISAKit小鼠血栓素B2(TXB2)试剂盒
植物25羟基D3试剂盒 植物25羟基D3试剂盒 规格型号：96T/48T 植物25羟基D3试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：植物25羟基D3试剂盒、植物25羟基D3eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
鱼孕激素试剂盒 鱼孕激素试剂盒 规格型号：96T/48T 鱼孕激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼孕激素试剂盒、鱼孕激素eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
鱼类状腺原酸试剂盒 鱼类状腺原酸试剂盒 规格型号：96T/48T 鱼类状腺原酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类状腺原酸试剂盒、鱼类状腺原酸eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
鱼类试剂盒 鱼类试剂盒 规格型号：96T/48T 鱼类试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类试剂盒、鱼类eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
NA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神经酶 (Neuraminidase / NA) Protein
phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原
EGFR重组人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein
CEP57 Protein Human 重组人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 标签)
PF4 Protein Human 重组人 CXCL4 / PF4 蛋白
3T3A31 小鼠胚胎成纤维细胞 杂交瘤(B类);C3110D2B2 前列腺癌细胞，DU145细胞 H4-ⅡE细胞，大鼠肝癌细胞 ALOX15B Others Human 人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 MS4A1 猪原代主动脉瓣膜间质细胞 大鼠原代胸主动脉平滑肌细胞
大鼠鼻黏膜上皮原代细胞神经生长因子(NGF)重组蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)
IL3RA Protein Human 重组人 IL3RA / CD123 蛋白
FZD5重组人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
TRIP10重组人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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