大鼠背根神经元原代细胞

大鼠背根神经元原代细胞

大鼠背根神经元细胞分离自脊椎背根神经节；感觉神经母细胞发出轴突，呈束状，左右对称地从神经管的背部进入，此时的脊神经节即改称为背根神经节。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元，即神经细胞，其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体，内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示，在光镜下是灰蓝色斑块状，称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起，能在神经元之间传递电冲动，突起的大小和形态各不相同，很难用常规的显微镜鉴别。脊髓背根神经节是周围神经的主要传入神经元，是感觉信号传导的中继站。背根神经元细胞的获取较为困难，需要在尽可能短的时间内通过解剖显微镜获得一定量的背根神经节组织。神经组织体外培养方法是当代神经科学一项很有价值的研究手段，背根神经节富含周围神经系统感觉神经元，已广泛用于轴突的导向及再生、中枢及周围神经系统的髓鞘形成、神经营养因子作用及受体分布、神经细胞衰老机制、基因治疗、组织工程等神经科学的研究。

产品名称：大鼠背根神经元细胞

组织来源：脊髓组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介

公司实验室分离的大鼠背根神经元采用胶原酶-酶联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠背根神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

猪肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒

Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)试剂盒

PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 猪内皮型合成酶3(eNOS-3)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-银环蛇毒素

血液赖(lysine)含量化学比色法定量试剂盒20次

NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)试剂盒规格：96T/48T

豚鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)试剂盒 ，英文名： MIF ELISA Kit

Human amyloid precursor protein (APP) ELISA Kit 人淀粉样前体蛋白(βAPP)试剂盒

MonkeyIerleukin1,IL-1ELISAKit白介素1(IL-1)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBGP(Osteocalcin/BoneGla-protein)ELISAKit兔

细菌氢/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量试剂盒20次

RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit兔子白介素9(IL-9)试剂盒规格：96T/48T

人粘蛋白1(MUC1)试剂盒   96T/48T   ELISA   组装/原装

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)试剂盒   96T/48T

人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)试剂盒   96T/48T

人早老素2(PS-2)试剂盒

NT5E重组大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 细胞调亡素/死亡受体5抗原

PRDX6重组人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein

IL17RC Protein Human 重组人 IL17RC 蛋白 (Fc 标签)

GHR Protein Mouse 重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白

293来源病毒包装细胞;ΦA 人上皮细胞 M-NFS-60 (小鼠白血病细胞G-CSF依赖性)     CD3E Others Human 人 CD3E 人细胞裂解液   人星形胶质细胞 Human  RSPO1 Protein Human 重组人 R-Spondin 1 / RSPO1 猪原代主动脉平滑肌细胞 人原代海绵体平滑肌细胞

大鼠背根神经元原代细胞环腺苷二0酸核糖水解酶(cADPRH)重组蛋白 Recombinant Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH)

CES2 Protein Human 重组人 CES2 / Carboxylesterase-2 蛋白

IFNA14重组小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Canine 重组狗 IL18R1 蛋白 (Fc 标签)

DCUN1D1重组人 DCUN1D1 / SCCRO 蛋白 Protein