大鼠瘢痕疙瘩成纤维原代细胞

大鼠瘢痕疙瘩成纤维原代细胞

大鼠瘢痕疙瘩成纤维细胞分离自皮肤瘢痕疙瘩组织；瘢痕疙瘩，俗称疤痕疙瘩，是皮肤伤口愈合或不明原因所致皮肤损伤愈合后所形成的过度生长的异常瘢痕组织，目前学术界认为各种原因导致的瘢痕如具有以下特点，可诊断为瘢痕疙瘩：①病变超过原始皮肤损伤范围；②呈持续性生长；③高起皮肤表面、质硬韧、颜色发红的结节状、条索状或片状肿块。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的瘢痕疙瘩成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纤维细胞同正常皮肤成纤维细胞在形态上没有表现出明显的差异。瘢痕疙瘩成纤维细胞生长同正常皮肤成纤维细胞的生长没有明显的差别。癜痕成纤维细胞对血清的依赖性低于正常皮肤成纤维细胞。

产品名称：大鼠瘢痕疙瘩成纤维细胞

组织来源：皮肤

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠瘢痕疙瘩成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

猪高铁血红蛋白(MHB)ELISA 试剂盒

Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人结核菌杆抗体IgG(TB-Ab IgG)试剂盒

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 猪热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-内肽

血液精(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量试剂盒20次

Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)试剂盒规格：96T/48T

植物D2(VD2)ELISA 试剂盒

Human ai liver cell membrane aibody (LMA) ELISA Kit 人抗肝细胞膜抗体(LMA)试剂盒

PorcineSomatostatin,SSELISAKit 猪(SS)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFP(MouseAlpha-fetoprotein)ELISAKit小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白

血液纤维蛋白溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性化学发光法定量试剂盒20次

Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit小鼠抗复合物(TAT)试剂盒

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小鼠胃肠癌标志物试剂盒   小鼠胃肠癌标志物试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胃肠癌标志物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胃肠癌标志物试剂盒、小鼠胃肠癌标志物试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠lisa试剂盒   小鼠试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠试剂盒、小鼠lisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠网膜素试剂盒   小鼠网膜素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠网膜素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠网膜素试剂盒、小鼠网膜素试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

PRLR重组小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形态发生蛋白4(抗原)

KIT重组人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 标签) Protein

CFD Protein Human 重组人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

CSF2RB Protein Rat 重组大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 标签)

293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系 Human  CEACAM1 Others Mouse 小鼠 CEACAM1 / CD66a 人细胞裂解液   人Burkkit淋巴瘤细胞;Daudi  T2细胞，转HLA-2基因B细胞 小鼠癌细胞,MA891细胞 人神经元cDNAHN cDNA 猪原代子宫内膜基质细胞 兔原代背根神经节细胞

大鼠瘢痕疙瘩成纤维原代细胞PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 肠道肽转运蛋白(小肽转运蛋白)多肽

CGB5 Protein Human 重组人 CGB5 蛋白

HA重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CD34 Protein Human 重组人 CD34 蛋白

DCN重组人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。