线粒体活性氧产生速率（ROS）荧光法

线粒体活性氧产生速率（ROS）荧光法公司正在热销的产品：cFn人细胞纤维连接蛋白ELISA检测试剂盒
MEPE人细胞外基质磷酸糖蛋白ELISA检测试剂盒
CYP21B人细胞色素P450c21B/21-羟化酶ELISA方法
CYP21A人细胞色素P450c21A/21-羟化酶ELISA方法
CYP450人细胞色素P450ELISA检测试剂盒

试剂组成和配制：

试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。

试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。

标准品：液体×1支（EP管中），2 μmol/mL酚标准液，4℃保存。

商品属性：

商品介绍：

公司产品仅用于科研测定意义
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，研究表明，机体95％以上的活性氧（ROS）都来自于线粒体，其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。

正常情况下，细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态，细胞内活性氧（ROS）水平维持在较低的生理范围；在病理情况下，细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破，细胞内活性氧水平过多，就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸，使机体出现氧化应激，同时，活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤，导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。

因此，通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。

测定原理：

荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜，在线粒体内被酯酶水解，形成无荧光的DCFH，DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合，线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。

需自备的仪器和用品：

多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。

粗酶液提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，4℃、8000g离心10min，取上清液待测。

2. 细菌或细胞：按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

3. 血液可直接测定，或者适当稀释后测定。

测定步骤：

1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。

3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸馏水，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A空白管。

4. 标准管：取EP管，加入4μL标准品，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A标准管。

5. 对照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸馏水，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。

6. 测定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。

其中标准管和空白管只需做一管，测定管和对照管每个样均需做。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

人角膜锁链蛋白(CDSN)酶联吸附测定试剂盒多主葡萄壳Phospho-ULK1 (Ser638) (D8K9O) Rabbit mAb

人接触蛋白1(CNTN1)酶联吸附测定试剂盒短密青霉Color-coded Prestained Protein Marker

人接触蛋白2(CNTN2)酶联吸附测定试剂盒黑曲霉SimpleChIP® DNA Purification Buffers and Spin Columns

人接触蛋白3(CNTN3)酶联吸附测定试剂盒香菇SGLT2 Antibody

人接触蛋白4(CNTN4)酶联吸附测定试剂盒黑曲霉Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb (IHC Formulated)

人接触蛋白相关蛋白1(CNTNAP1)酶联吸附测定试剂盒酿酒酵母N-Cadherin (13A9) Mouse mAb

人接触蛋白相关蛋白样蛋白4(CNTNAP4)酶联吸附测定试剂盒梨轮纹病CYP11A1 (D8F4F) Rabbit mAb

人接头蛋白2(ELMO2)酶联吸附测定试剂盒枯草芽孢杆Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Biotinylated)

人结蛋白(Des)酶联吸附测定试剂盒 草分枝杆Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb

人结构特异性识别蛋白1(SSRP1)酶联吸附测定试剂盒线壳囊孢(座线孢)Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb

人结合珠蛋白(HP)酶联吸附测定试剂盒 百脉根中间根瘤Phospho-Rad50 (Ser635) Antibody

人触珠蛋白相关蛋白(HPR)酶联吸附测定试剂盒 烟色齿耳Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Biotinylated)

人骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)酶联吸附测定试剂盒栎Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (PE Conjugate)

人转运蛋白2(TNPO2)酶联吸附测定试剂盒反硝化盐单胞SimpleChIP® Chromatin IP Buffers

人线粒体解偶联蛋白2(UCP-2)酶联吸附测定试剂盒薄层属UBE2C Antibody
线粒体活性氧产生速率（ROS）荧光法载脂蛋白O抗体Human JAML ELISA Kit旋毛虫抗体（Trichinella Ab）ELISA试剂盒--动物，人

β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1抗体Human JAKMIP2(Janus kinase and microtubule-interacting protein 2) ELISA Kit2216E琼脂

共济失调性眼球运动功能丧失相关蛋白AOA1抗体Human JAM2 ELISA Kit多粘素B肉汤基础（SCPB）

三号染色体开放阅读框抗体Human KANK2 ELISA Kit血琼脂基础   分离培养（GB标准）

腺嘌呤磷酸核糖转移酶抗体Human KANK2 ELISA Kit细 L型分离琼脂用于L型细分离培养

磷酸化水通道蛋白2抗体Human JAM2 ELISA KitL-亮氨酸

ADP核糖基化因子1抗体Human JAML ELISA KitL-精氨酸L-谷氨酸盐

乙型肝炎病X相关蛋白2抗体Human JIP1 ELISA Kit人柯萨奇病IgM（Cox V-IgM）ELISA试剂盒,Cox V-IgM ELISA