鲤疱疹病型PCR检测试剂盒说明书

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作：​

实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
Nesfatin-1/Nucb2  新的饱食分子蛋白体进口/国产TMEM2L/KIAA1199  跨膜蛋白2样蛋白体

NDUFAF4  激调节增值细胞相关蛋白体进口/国产SAMHD1/HDDC1/MOP5  单核细胞蛋白5体

NCX1/SLC8A1  钠钙交换蛋白1体进口/国产beta-Amyloid(1-40)  β淀粉样肽（1-40）体

NDUFS1/NADH dehydrogenase (ubiquinone) FeS protein 1 (75kD)  线粒体复合物NDUFS1蛋白体进口/国产HDDC3  四鸟苷水解酶体

NCX2/SLC8A2  钠钙交换蛋白2体进口/国产PLEKHM1  石骨症相关蛋白PLEKHM1体

NDUFA1  NADH氧化还原酶辅酶1体进口/国产PLEKHM2/SKIP  血小板白细胞C激酶底物同源结构域M2体

NDUFA10  NADH氧化还原酶辅酶10体进口/国产PLEKHM3  血小板白细胞C激酶底物同源结构域M3体Phospho-MARCKS (Ser152 + Ser156)英文名称：KCNN419号染色体开放阅读框75体

Phospho-MARCKS (Ser162)英文名称：KLHL23隐花色蛋白1体

Met (c Met)英文名称：KBTBD10隐花色蛋白2体

phospho-MAP3K9+MAP3K10(Thr312 + Thr266)英文名称：KBTBD4钙通道L型α2多肽体

TYRO3英文名称：KLHL24L型电压依赖型钙通道β3(L-type Ca++ CPβ3)体

MAP3K9英文名称：KLHL21L型电压依赖型钙通道β4体

MC3 Receptor英文名称：KLHL25电压依赖性钙通道CACNA1G+CACNA1H体

Menin英文名称：Kinesin钙结合蛋白1体
鲤疱疹病型PCR检测试剂盒说明书原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。