戈尔迪勒病毒PCR检测试剂盒说明书

PCR基本操作：
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原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
戈尔迪勒病毒PCR检测试剂盒说明书PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
NGAL/Lipocalin 2  脂质运载蛋白体进口/国产CCDC146  卷曲螺旋结构域蛋白146体

NFkB p105/p50  细胞核因子p50/k因结合核因子体进口/国产CCDC147  卷曲螺旋结构域蛋白147体

Phospho-NFκB-p105/p50(Ser927)  化细胞核因子p50/k因结合核因子体进口/国产ANGPTL1/Angiopoietin 1/ANG-1  血管生成-1体

Phospho-NFKB1(Ser933)  化细胞核因子p50/k因结合核因子体进口/国产CCDC148  卷曲螺旋结构域蛋白148体

Phospho-NFKB1(Ser903)  化细胞核因子p50/k因结合核因子体进口/国产Angiopoietin 2/ANG2  血管生成2体

Phospho-NFKB1(Thr932)  化细胞核因子p50/k因结合核因子体进口/国产CCDC153  卷曲螺旋结构域蛋白153体

Phospho-NFKB1(Ser907)  化细胞核因子p50/k因结合核因子体进口/国产CCDC158  卷曲螺旋结构域蛋白158体Nck beta英文名称：MAGI120号染色体开放阅读框31体

NPHS2英文名称：Munc13 成簇相关蛋白1体

NMT1英文名称：Membralin肿瘤/丸原2体

Natriuretic Peptide Receptor A英文名称：MNX1肿瘤/丸原1B

NRG3英文名称：MOBP皮肤T细胞淋巴瘤相关原5体（膜瘤表达原6）

NEDD1英文名称：MRCK alpha肿瘤/丸原3体

NEK1英文名称：MyD88多巴胺神经营养因子体

NAT8L英文名称：Myelin Protein Zero钙依赖分泌激活蛋白2/自闭症的相关蛋白体