详细介绍
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
产品名称 | 英文名称 | 分类 |
脑膜炎黄杆菌PCR检测试剂盒供应商 | Flavobacterium meningosepticumPCR | PCR检测试剂盒 |
PCR基本操作:
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
脑膜炎黄杆菌PCR检测试剂盒供应商20mg/支BNIP1/TRG8 Bcl2相互作用蛋白1体(转化相关因8蛋白)ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)
20mg/支BNIP2 Bcl2相互作用蛋白2体ELISA Kit for Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2)
Cycloserine20mg/支CLDND1 膜蛋白CLDND1体ELISA Kit for Intermediate Density Lipoprotein (IDL)
Cyclosporine20mg/支SCN11A/NAV1.9 钠通道蛋白11α体ELISA Kit for Cadherin, Placental (CDHP)
20mg/支SCN10A/NAV1.8 钠通道蛋白10α体ELISA Kit for Alpha-1-Antichymotrypsin (a1ACT)
Cyclothiazide (AS)20mg/支ICAM5/Telencephalin 细胞间粘附分子5体ELISA Kit for Alpha-2-Macroglobulin (a2M)
Cyproheptadine Hydrochloride20mg/支SCN1B 钠离子通道β1体ELISA Kit for Alpha-Lactalbumin (aLA)
20mg/支SCN8A/Nav1.6 钠通道蛋白8α体ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 4 (ANGPTL4)phospho-NFKB p65(Thr435)英文名称:LGALS3BP细胞色P450单氧化酶体
phospho-NFKB p65(Thr254)英文名称:Leptin细胞色C体
phospho-NFKB p65(Thr505)英文名称:Lipin 1细胞角蛋白1体
NET1英文名称:LGR6巨细胞病PP65/CMV低质脂蛋白体
Nectin 3 英文名称:Lambda Light Chain周期C体
NHLH2英文名称:LAMP2周期B1体
Nodal英文名称:LAS2细胞球蛋白体
NANOS1英文名称:phospho-LEO1(Ser551)周期D1体
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。