详细介绍
肠激酶CAS号:9014-74-8产品概述:
肠激酶
英文名称:Enterokinase;Enteropeptidase
其他名称:肠胨酶;肠蛋白酶;肠肽酶;肠激活酶;EK酶
CAS号:9014-74-8
级别:Rebinant
产品描述:肠激酶(Enterokinase, light chain)是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为胰酶,也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。由于肠激酶具有高度专一性,水解效率高的特点,它被广泛地应用于基因工程产品的开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。本产品为采用重组酵母分泌表达的高纯度、高活性的牛肠激酶,适用范围广(4-45oC,pH4.5-9.5),并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性
活力定义:在37oC,16小时内将0.5毫克的Thioredoxin-NP-27 95%降解为NP-27所需要的酶量定义为1个活性单位
性状(以下信息仅供参考):灭菌液体。重组体
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)是一种丝氨酸蛋白酶,它能高效专一性地水解工程菌表达的融合蛋白(识别顺序是—(Asp)4Lys↓--)释放出目的蛋白质。由于肠激酶具有高度专一性,水解效率高的特点,它被广泛地应用于基因工程产品的开发;它能够作为蛋白酶特异性地识别并切割含肠激酶切割位点的底物,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。但天然肠激酶来源有限,并且从动物组织提取的肠激酶污染有其他蛋白酶,这给实际应用带来了困难。这就要求用基因工程方法高纯度的肠激酶。基因工程方法的高纯度肠激酶活性与天然酶相似,但肠激酶切割速率更快
保存:-20℃
公司优势:
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Western Blot操作方法:
1.培养细胞蛋白质样品的制备:
1)在合适的盐浓度下,应保持蛋白质的最大溶解性和可重复性。
2)选择合适的表面活性剂和还原剂,破坏所有非共价结合的蛋白质复合物和共价键二硫键,使其形成一个各自多肽的溶液。
3)尽量去除核酸,多糖,脂类等干扰分子。
4)防止蛋白质在样品处理过程中的人为的修饰,制备过程应在低温下进行,以避免细胞破碎释放出的各种酶类的修饰(建议加入合适的蛋白酶抑制剂)
5)样品建议分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接以液体状态置-80℃中保存,但要注意不要反复冻融。
2.组织样品的制备:
手术切除的组织块迅速置于预冷的0.95生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成几个较小的组织块放入机戒组织匀浆器中,按组织净重,裂解液=1:10的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆,离心收集上清(如有粘稠物可超声处理,具体方法见细胞培养的样品制备,也可以冷冻干燥降解核酸后,将冻干的蛋白质样品溶解在适当的上样 buffer中,混匀后静置3小时使样品中的蛋白质充分的溶解,有5分钟即可,4度离心收集。)加入Laemmli样品缓冲液(视蛋白样品浓度,以1:1或1:2的比例混合)强力混匀,样品置100度的水浴箱水浴加热3-5分钟,10000g离心10分钟,取上清液,将其转入另一洁净的试管中,至此,电泳样品已准备就绪(样品即可立即使用也可也可以分装冻存,-20℃存放的样品可稳定保持数月。)
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