末端转移酶CAS号：9027-67-2

末端转移酶CAS号：9027-67-2产品概述：
末端转移酶  
英文名称：TDT；Terminal Transferase；Terminal Deoxynucleotidyl Transferase  

其他名称：末端脱氧核苷酸转移酶；胸腺五肽  

CAS号：9027-67-2  

分子量：60000  

级别：BR  

来源：大肠杆菌细胞，含有编码牛胸腺末端脱氧核苷转移酶的基因  

浓度：20u/ul  

活性定义：是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量  

酶活性分析混合物：66mM二甲胂酸钾（PH7.2），1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP  

保存液组分：100mM 醋酸钾（PH6.8)、2mM β-巯基乙醇，0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油  

5×反应缓冲液：1M 二甲胂酸钾、125mM Tris，0.05%(v/v) Triton X-100，5mM CoCL2(PH7.2,25℃)  

抑制剂：金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子  

失活：加入EDTA，70℃加热10分钟  

质量保证：测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染  

注意：由于含有CoCL2，TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容，需采用柱离心法或苯酚/氯抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物，除去CoCL2  

性状(以下信息仅供参考)：悬浮液，重组酶。末端转移酶（Terminal transferase, TdT）是一种无需模板的DNA聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是：先在载体上打开一单个位点，把它与末端转移酶和某一dNTP（如dATP）一起保温以使添尾，另一待插入的外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP（dTTP）用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火，使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复。用途：

本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)催化DNA的3'末端添加同聚物；DNA的3'末端标记  
保存：-20°C  

公司优势：
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Western Blot操作方法：
1.培养细胞蛋白质样品的制备： 
1）在合适的盐浓度下，应保持蛋白质的最大溶解性和可重复性。 
2）选择合适的表面活性剂和还原剂，破坏所有非共价结合的蛋白质复合物和共价键二硫键，使其形成一个各自多肽的溶液。 
3）尽量去除核酸，多糖，脂类等干扰分子。 
4）防止蛋白质在样品处理过程中的人为的修饰，制备过程应在低温下进行，以避免细胞破碎释放出的各种酶类的修饰（建议加入合适的蛋白酶抑制剂）  
5）样品建议分装成合适的量，然后冷冻干燥或直接以液体状态置-80℃中保存，但要注意不要反复冻融。  
2.组织样品的制备：
手术切除的组织块迅速置于预冷的0.95生理盐水中，漂洗数次，以清洁表面的血迹，将组织称量后切成几个较小的组织块放入机戒组织匀浆器中，按组织净重，裂解液=1：10的比例，加入相应体积的裂解液进行匀浆，离心收集上清（如有粘稠物可超声处理，具体方法见细胞培养的样品制备，也可以冷冻干燥降解核酸后，将冻干的蛋白质样品溶解在适当的上样 buffer中，混匀后静置3小时使样品中的蛋白质充分的溶解，有5分钟即可，4度离心收集。）加入Laemmli样品缓冲液（视蛋白样品浓度，以1：1或1：2的比例混合）强力混匀，样品置100度的水浴箱水浴加热3-5分钟，10000g离心10分钟，取上清液，将其转入另一洁净的试管中，至此，电泳样品已准备就绪（样品即可立即使用也可也可以分装冻存，-20℃存放的样品可稳定保持数月。）
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PSMD9  蛋白酶调解因子9抗体规格: 0.2ml
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