详细介绍
卵白素(鸡蛋)CAS号:1405-69-2产品概述:
卵白素(鸡蛋)
英文名称:Avidin(chiken egg white)
其他名称:亲和素;抗生物素蛋白;亲合素
CAS号:1405-69-2
分子量:glycoprotein mol wt 66 kDa;subunit mol wt 16 kDa
级别:BR
纯度:≥98.0%(SDS-PAGE)
Protein:≥95.0%
活力定义:One unit will bind 1.0 μg of d-biotin
溶解性(5% water):Pass
性状(以下信息仅供参考):白色粉末,是一种糖蛋白,由于每个分子由4个亚基组成,因此可以和4个生物素分子亲密结合。pI 10~10.5;在pH9~13缓冲液中性质均稳定,耐热并耐多种蛋白水解酶的作用。通常,亲合素的活性单位是以亲合素结合生物素的量来表示的,即以能结合1Pg生物素所需要的亲合素量为1个亲合素活性单位。一般1Pg亲合素约含13~15个活性单位
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途
保存:2~8℃
公司优势:
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Western Blot操作方法:
1.培养细胞蛋白质样品的制备:
1)在合适的盐浓度下,应保持蛋白质的最大溶解性和可重复性。
2)选择合适的表面活性剂和还原剂,破坏所有非共价结合的蛋白质复合物和共价键二硫键,使其形成一个各自多肽的溶液。
3)尽量去除核酸,多糖,脂类等干扰分子。
4)防止蛋白质在样品处理过程中的人为的修饰,制备过程应在低温下进行,以避免细胞破碎释放出的各种酶类的修饰(建议加入合适的蛋白酶抑制剂)
5)样品建议分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接以液体状态置-80℃中保存,但要注意不要反复冻融。
2.组织样品的制备:
手术切除的组织块迅速置于预冷的0.95生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成几个较小的组织块放入机戒组织匀浆器中,按组织净重,裂解液=1:10的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆,离心收集上清(如有粘稠物可超声处理,具体方法见细胞培养的样品制备,也可以冷冻干燥降解核酸后,将冻干的蛋白质样品溶解在适当的上样 buffer中,混匀后静置3小时使样品中的蛋白质充分的溶解,有5分钟即可,4度离心收集。)加入Laemmli样品缓冲液(视蛋白样品浓度,以1:1或1:2的比例混合)强力混匀,样品置100度的水浴箱水浴加热3-5分钟,10000g离心10分钟,取上清液,将其转入另一洁净的试管中,至此,电泳样品已准备就绪(样品即可立即使用也可也可以分装冻存,-20℃存放的样品可稳定保持数月。)
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