详细介绍
参数规格:
货号:YS-01P6398
产品规格:48T 0.2PCR管
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
运输:低温
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
实验方法步骤:
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
邻二酚紫 INDβ-萘酚 荧光指示剂, ≥99.0% (GC小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)免疫试剂盒
邻菲罗啉盐盐 98%3,5-二-1-溴 98%小鼠β半乳糖(βGAL)免疫试剂盒
红 AR酮缩甘油 98%小鼠β氨基己糖A(β-Hex A)免疫试剂盒
1,10-菲罗啉(无水) 99%3,5-二异酯 97%小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫试剂盒
亚硝基铁 CPN-甲基邻二盐盐 99%小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)免疫试剂盒
玫瑰红钠 AR1,2,3,5-四 96%小鼠β1肾上腺能受体(β1AR)抗体免疫试剂盒
罗丹明B AR1,2,3,5-四 分析标准品小鼠α羟基丁脱氢(αHBDH)免疫试剂盒
罗丹明B 高纯级,≥95.0%(HPLC)1,3,5-三 99%小鼠α葡萄糖(α-glucosidase)免疫试剂盒
半二甲酚橙 AR1,3,5-三标准溶液 0.109mg/ml,基体: 异辛烷小鼠α-黑色激(α-MSH)免疫试剂盒
二乙基二硫代氨钠(铜试剂) AR,99.0%1,2,4,5-四 98%小鼠αS转移(α-GST)免疫试剂盒
氧化锶 AR1,2,4,5-四标准溶液 0.104mg/ml,基体:异辛烷小鼠α甘露糖(α Manase)免疫试剂盒
百里香酚蓝 IND1,2,4,5-四 分析标准品小鼠αN已酰氨基葡糖(αNAG)免疫试剂盒
百里香酚蓝 ACS reagent, 95 %2,4,6-三 98%小鼠αL岩藻糖(AFU)免疫试剂盒
百里香 indicator1,2,4,5-四标准溶液溶剂:甲小鼠αL艾杜糖(IDUA)免疫试剂盒
香草 AR,99%2,4-二硝 CP小鼠α2抗纤溶(α2-AP)免疫试剂盒
鹅源性核酸检测试剂盒48T 0.2PCR管兔子促黄体激(LH)ELISA试剂盒,2,3-二基哌丁酰基辅A合成3抗体
兔子补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒,N-Boc-D-色氨脂肪源性亮氨氨基肽抗体(血管内皮生长因子诱导蛋白)
兔子白介6(IL-6)ELISA试剂盒,N-Boc-D-色氨线粒体凋亡诱导因子2抗体
L-高精氨盐盐4-基乙硫ABL2蛋白抗体
人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒,4-基乙硫血管紧张转换ACE1抗体
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒, OxLDL ELISA3-甲氧基-1-血管紧张转换2抗体
人基质金属蛋白7(MMP-7)ELISA试剂盒,3-甲氧基-1-Acinus抗体
人肾小球组织糖基化终末产物(GTE-AGE)ELISA试剂盒,苄基溴化镁醋激1抗体
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。