详细介绍
实验方法步骤:
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
参数规格:
货号:YS-01P6334
产品规格:48T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
运输:低温
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
1,2-二乙基苯 Standard for GC,≥99.0% (GC)正丁硫 97%猪蓝耳病(PRRSV)抗体(IgG)免疫试剂盒
二硫代乙酰 98%苄硫 98%猪赖氨酰氧化免疫试剂盒
1,1-二苯-2-苦基肼 96%二糠基硫 98%猪口蹄疫抗体免疫试剂盒
二氯甲 98%2,3-二乙基-5-甲基吡 98%猪口蹄疫抗体(IgM)免疫试剂盒
4,4'-二氯二苯甲酮 分析标准品二乙硫 97%猪口蹄疫抗体(IgG)免疫试剂盒
邻苯二甲二异辛酯 分析标准品, ≥99.5% (GC)2,3-二甲基吡 98%猪可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒
二氢辣椒 分析标准品 2,5-二甲基吡 98%猪可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)免疫试剂盒
二异丁基酮 99%5-羟甲基糠 98%猪可溶性间粘附分子1(sICAM-1)免疫试剂盒
1,7-二氨基庚烷 98%5-羟甲基糠 分析标准品,>99%猪可溶性P选择(sP-Selectin)免疫试剂盒
1,2-二 分析标准品5-羟甲基糠 99%猪抗中性粒弹性蛋白抗体(ANEA)免疫试剂盒
4,4-二溴联苯 分析标准品1,6-己二硫 97%猪巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒
色标GStandard for GC,≥99.5% (GC)异香草 98%猪巨噬迁移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)免疫试剂盒
二基硅烷 98%丁甲硫酯 98%猪金属硫蛋白(MT)免疫试剂盒
3,4-二二苯甲酮 98%甲硫 99%猪结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)免疫试剂盒
2,4-二肼 ~0.005 M in ethanol, for TLC 吡 99%猪窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫试剂盒
肠出血性大肠杆菌O104核酸检测试剂盒48T小鼠β葡糖(β-glucosidase)ELISA试剂盒,3-甲氧基氮杂环丁烷盐盐三磷腺结合盒转运蛋白F亚基3抗体
小鼠甲状腺(T4)ELISA试剂盒,四正辛基三磷腺结合盒转运蛋白A亚基5抗体
兔子可溶性E选择(sE-selectin)ELISA试剂盒,四正辛基ADCK1蛋白抗体
促胃液受体(GsaR)ELISA试剂盒--动物,人四正辛基酰基辅A结合结构域蛋白4抗体
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒--动物,人碳双(三苯基膦)氯化铱α/β水解4抗体
抗甲型肝炎病IgG抗体(anti-HAV)ELISA试剂盒--动物,人碳双(三苯基膦)氯化铱ADCK2蛋白抗体
结核菌杆抗体IgG(TB-Ab IgG)ELISA试剂盒--动物,人(2,2-Bipyridine)Dichloropalladium(Ⅱ)乙脱氢16家庭A1抗体
红生成(EPO)ELISA试剂盒--动物,人顺-二氯双(吡啶基)铂(II)粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体