详细介绍
实验方法步骤:
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
参数规格:
货号:YS-01P6586
产品规格:48T 0.2PCR管
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
运输:低温
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
三特丁基膦 1.0 M in toluene常春藤皂元 分析标准品,≥98%人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)免疫试剂盒
噻吩-2,3-二甲 98%高三尖杉酯 分析标准品,≥98%人Prominin 2(PROM2)免疫试剂盒
alpha-三联噻吩 99%哈巴俄甙 分析标准品,≥98%人Podocin 免疫试剂盒
三(二亚苄基酮)二钯,加合物 98%大麦芽 分析标准品,≥99%人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成(PL7)免疫试剂盒
三(2-甲基)膦 97%豆腐果甙 分析标准品,≥98%人PL12抗体/抗氨酰tRNA合成(PL12/AlaRS)免疫试剂盒
四(三基膦)钯(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%异欧前胡 分析标准品,≥99%人PC4,SFRS1互动蛋白1(PSIP1)免疫试剂盒
2,2',7,7'-四溴-9,9'-螺二芴 98%盐药根 分析标准品,≥98%人P53抗体免疫试剂盒
2-乙酰基-5-降烯 95%党参炔 分析标准品,≥98%人P2蛋白抗体(IgM)免疫试剂盒
N-乙烯基咔唑 98%甘草 分析标准品,≥98%人P2蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒
4,5-双二基膦-9,9-二甲基氧杂蒽 98%蒿本内酯 分析标准品,≥90%人P27蛋白(P27)免疫试剂盒
2-氨基-4--6-甲氧基嘧啶 99%乌药内脂 分析标准品,≥98%人P0蛋白抗体(IgM)免疫试剂盒
2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶 98%盐川芎 分析标准品,≥98%(HPLC)人P0蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒
3-氨基吡-2-羧 98%α-倒捻子 分析标准品,≥98%人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成抗体(OJ/IleRS)免疫试剂盒
2-氨基-6- 98%罗汉果V 分析标准品,≥98%人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨(AcSDKP)免疫试剂盒
2-氨基-4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三 98%(-)-薄荷 分析标准品,≥99.5%人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG)免疫试剂盒
派琴虫核酸检测试剂盒48T 0.2PCR管小鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA试剂盒,4-甲基-3,5-二甲基异噁唑22号染色体开放阅读框36抗体
小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒,2',5'-二乙酮补体组分1q子成分样蛋白1抗体
大鼠促性腺激释放激受体抗体(GNRHR-Ab)ELISA试剂盒,2',5'-二乙酮CD44抗体
大鼠端粒(TE)ELISA试剂盒,2',5'-二乙酮9号染色体开放阅读框114抗体
鸡白介4(IL-4)ELISA试剂盒,吡啶-2-CD8β链(CD8-β)抗体
嗜盐菌选择性琼脂 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养(GB标准)2-氨基-4-吡啶6号染色体开放阅读框1抗体
甲壳 Chitin2-氨基-4-吡啶γ晶状体蛋白S/γS-crystallin抗体
人可溶性间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒,2-溴-6-氨基吡啶9号染色体开放阅读框72抗体