猪水泡病病毒PCR检测试剂盒

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产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

服务流程：

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

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实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

三、注意事项

１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。

２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。

３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。

５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。

６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。

７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。

公司正在出售的产品：

激肽释放mei12(KLK12)重组蛋白英文名称：Recombina Kallikrein 12 (KLK12)物种：Homo sapiens (Human，人)

激肽释放mei13(KLK13)重组蛋白英文名称：Recombina Kallikrein 13 (KLK13)物种：Homo sapiens (Human，人)

激肽释放mei14(KLK14)重组蛋白英文名称：Recombina Kallikrein 14 (KLK14)物种：Homo sapiens (Human，人)

肌肉磷suan果糖激mei(PFKM)重组蛋白英文名称：Recombina Phosphofructokinase, Muscle (PFKM)物种：Homo sapiens (Human，人)

肌肉磷suan果糖激mei(PFKM)重组蛋白英文名称：Recombina Phosphofructokinase, Muscle (PFKM)物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

肝脏磷suan果糖激mei(PFKL)重组蛋白英文名称：Recombina Phosphofructokinase, Liver (PFKL)物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

肌球蛋白ⅤA(MYO5A)重组蛋白英文名称：Recombina Myosin VA (MYO5A)物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

乙酰复合胺-O-甲基转移mei(ASMT)重组蛋白英文名称：Recombina Acetylserotonin-O-Methyltransferase (ASMT)物种：Homo sapiens (Human，人)

蛋白酪氨suan磷suanmeiⅣA3(PTP4A3)重组蛋白英文名称：Recombina Protein Tyrosine Phosphatase Type IVA 3 (PTP4A3)物种：Homo sapiens (Human，人)

乙酰乙酰转移mei2(ACAT2)重组蛋白英文名称：Recombina Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2 (ACAT2)物种：Homo sapiens (Human，人)
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外周蛋白(PRPH)ELISA试剂盒Human Peripherin(PRPH)ELISA Kit

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer

5 μl     dNTP mix （2mM）

4 μl     引物1（10pM）

2 μl     引物2（10pM）

2 μl     Taq酶 （2U/μl）

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）

1 μl      加ddH2O至 50 μl

视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。