详细介绍
人原代椎体终板软骨细胞专用培养基
人原代椎体终板软骨细胞培养基由团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持人原代椎体终板软骨细胞优良的生长状态。
本产品中已包含人原代椎体终板软骨细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于人原代椎体终板软骨细胞的培养。
产品主要成分:
名称 | 体积 | 浓度 | 保存条件 |
原代软骨细胞基础培养基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代软骨细胞培养添加剂 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 终浓度5% | -20℃、避光 |
双抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
运输和保存
运输:放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2个月;-20℃,避光,保存6个月。
1)复苏人原代椎体终板软骨细胞培养基:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查人原代椎体终板软骨细胞培养基密度。
2)细胞传代:如果人原代椎体终板软骨细胞培养基密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗人原代椎体终板软骨细胞培养基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若人原代椎体终板软骨细胞培养基大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待人原代椎体终板软骨细胞培养基生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYB 人椎间盘髓核细胞培养基 100mL | Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Avidin 兔抗亲和素 规格 1mg |
t-PA ELISA Kit 大鼠组织型纤溶酶原激活剂 96T | RRAS2: 畸胎瘤癌基因RAS相关病毒抗体 0.2ml |
Anti-FOXF1/FITC 荧光素标记叉头蛋白F1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Phospho-MAP3K8 (Ser400): 0酸化原活化蛋白激酶激酶8抗体 0.1ml |
鼠抗人癌胚抗原单克隆抗体(包被) Anti-CEA 0.1ml | Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化二氢嘧啶酶样2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
MAL: MAL蛋白抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL7 kelch样蛋白7抗体 规格 0.2ml |
HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶Multi-class antibodies规格: 48T | 人肾癌Wilms细胞;G401 |
293 Ad5+细胞,人原胚肾转化细胞系 大鼠肝癌细胞,H4-ⅡE细胞 CL-0316A7r5(大鼠胸大动脉平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2 | DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人细胞裂解液 (阳性对照) |
Goat Anti-human Fibrinogen/FITC 荧光素标记羊抗Multi-class antibodies规格: 0.3ml | KP-N-NS(人肾上腺母细胞瘤细胞(脑转移)) 5×106cells/瓶×2 破伤风杆菌/梭菌Closidium tetani |
OGFOD1: 末端多聚腺苷酸1蛋白抗体 0.2ml | BCAM Others Human 人 BCAM 人细胞裂解液 (阳性对照) |
FibroFectagen? 成纤维细胞转染试剂盒 | 大鼠癌细胞;SHZ-88 |
Anti-Caspase-9/FITC 荧光素标记白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 大鼠心肌细胞RCM |
Rabbit Anti-IgG/FITC FITC标记的兔抗猪IgG 0.3ml | 人原代椎体终板软骨细胞专用培养基SERPINA11 Others Mouse 小鼠 SERPINA11 / Serpina11 人细胞裂解液 (阳性对照) |
T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人细胞裂解液 (阳性对照) | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) |
SW620人结肠癌细胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS | 仓鼠肾细胞;HL-1 |
1.使用人原代椎体终板软骨细胞培养基时应注意无菌操作,避免污染。
2.本产品含有血清和双抗,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接使用。
3.为保持本人原代椎体终板软骨细胞培养基的优良使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。
4.所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。
5.本产品只供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。
6.培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响人原代椎体终板软骨细胞培养基正常使用。