犬前列腺特异性抗原（PSA）酶联免疫试剂盒

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犬前列腺特异性抗原(PSA)酶联免疫试剂盒几种操作方法：

※夹心法，检测大分子抗原，一般的操作步骤为:
▪将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体√
▪加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结√

▪洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结√

▪洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结√

▪洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果√

※间接法，常用于检测抗体，一般的操作步骤为：
▪将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原√
▪加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结√
▪洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结√
▪洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器测定塑胶盘中的吸光值，以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量√
※竞争法，是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：
▪将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体√
▪加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结√
▪加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来√
▪洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅√
▪当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA√

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