霍乱弧菌核酸检测试剂盒48T 0.2PCR管

操作程序：

由您提供该实验中目的基因的相关资料（如：基因名称、序列等信息），我们共同探讨服务的可能性和技术路线；

商定服务收费、付款方式、服务期限等，并签定技术服务合同。

有您提供实验所需的足够量的实验样本（100mg组织或107个细胞），本公司不接受您提供的RNA样本

PCR所需引物/探针（如果用探针法），可以由您自己提供，也可以委托本公司设计合成（费用另计）。如果由您自己提供，必须是PAGE纯化的高质量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探针。

我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。

提供实验报告，包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。

自备物品：

15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶标板：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

酶标仪：用于微量样品比色分析

储存条件：

14℃或－20℃

准备物品

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

定量PCR方法：

a、竞争法

选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。

b、内参照法

在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。

c、PCR－ELISA法

利用di高辛或等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。

使用方法：

一、样品采集：

1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。

2、血液样品：用抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。

3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。

4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。

二、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）

1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。

4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用

6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

硫奎尼丁 USP级硫脲 AR，99%小鼠性T淋巴相关抗原4(CTLA-4/CD152)免疫试剂盒

2-喹喔啉羧 97%硫脲 CP，98%小鼠硒蛋白M(SELM)免疫试剂盒

罗丹明B 高纯级，≥95.0%（HPLC）硫脲 ACS, ≥99.0%小鼠戊型肝炎病(HEV)抗体(IgG)免疫试剂盒

树脂天青 90%(R)-(+)-2,2'-双(二苯膦基)-1,1'-联萘 98%小鼠戊糖(Pentosidine)免疫试剂盒

罗丹明6G AR(S)-(-)-2,2'-双(二苯膦基)-1,1'-联萘 98%小鼠胃泌调节免疫试剂盒

树脂天青 for cell culture,≥90% (HPLC)(±)-2,2'-双-(二苯膦基)-1,1'-联萘 98%小鼠胃泌(Gastrin)免疫试剂盒

芘 99%二苯基次膦酰氯 98%小鼠胃动(MTL)免疫试剂盒

迷迭香 分析标准品，≥97%对氯苯甲 AR,99.0%小鼠胃蛋白(PG)免疫试剂盒

 分析标准品，99%芦荟大黄 分析标准品小鼠维生K1(VK1)免疫试剂盒

D-核糖-5-磷二钠盐 95%芦荟大黄 95%小鼠维生E(VE)免疫试剂盒

(R)-1-氨基-8-(二苯基膦)-1,2,3,4 -四氢 97%红  分析标准品，≥98%小鼠维生D3(VD3)免疫试剂盒

海藻钠 生化级，用于固定、等梓 分析标准品,≥97% (HPLC)小鼠维生D2(VD2)免疫试剂盒

天狼星玫红，BB AR梓 ≥97% (HPLC)小鼠维生D(VD)免疫试剂盒

亚磷钠，五水 AR1-脱氧野尻霉 分析标准品，≥95%小鼠维生C(VC)免疫试剂盒

7B 95%脱水穿心莲内酯 分析标准品，≥98%小鼠维生B6(VB6)免疫试剂盒
霍乱弧菌核酸检测试剂盒48T   0.2PCR管小鼠氧化低密度脂蛋白抗体（OLAb）ELISA试剂盒,(R)-(+)-1-苯基乙自噬相关蛋白18抗体

兔子γ干扰（IFN-γ）ELISA试剂盒,(R)-(+)-1-苯基乙自噬相关蛋白4A抗体

间粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA试剂盒--动物，人(1R,2S,5R)-(-)-薄荷基 (S)-p-甲苯亚磺酯载脂蛋白A4抗体

多肽YY（Peptide-YY）ELISA试剂盒--动物，人3,5-二叔丁苯12脂氧合抗体

抗中性粒/中心体抗体（ACA）ELISA试剂盒--动物，人3,5-二叔丁苯血管紧张III抗体

艾柯病IgM（ECHO IgM）ELISA试剂盒--动物，人7,7,8,8-四基对苯二二腺环化3抗体

糖蛋白130（gp130）ELISA试剂盒--动物，人7,7,8,8-四基对苯二二血管动蛋白抗体

Ｄ/E中和琼脂7,7,8,8-四基对苯二二腺病早期E1A蛋白抗体