登革热病毒PCR检测试剂盒说明书

PCR基本操作：
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原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
登革热病毒PCR检测试剂盒说明书PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
 HEC-1-A(人子宫内膜细胞)大鼠冠状动脉内皮细胞*培养

溶葡球酶,溶葡萄球酶  质量BR,5000U/Pack Lysostaphin

 酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae铜绿假单胞 Pseudomonas aeruginosa

百里香,麝香草 质量AR Thymol

 大鼠膀胱成纤维细胞*培养LS-174T(人结肠细胞)

亚兰,亚蓝 质量BS Methylene Blue

 宇佐曲 Aspergillus usamii中慢生华癸根瘤 Mesorhizobium huakuii

Sulfo NHS;N-羟硫代琥珀酰亚 质量>99%,BR sulfo-NHS

 球亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis嗜热链球 Streptococcus thermophilus

沃妙林 质量>97%,BR Valnemulin HCl

 黑绿木刺芹侧耳 Pleurotus eryngii

泰乐 质量>95%,BR Tylosin phosphate

 小鼠骨髓瘤细胞小鼠成纤维细胞

左氧星 质量>98.5%,BR,可用于细胞培养 Levofloxacin HCl

 HL-60, 人早幼粒白血病细胞人动脉血管平滑肌细胞*培养

左氧星(标准品) 质量>98%,标准品 Levofloxacin HClLRCH3英文名称：phospho-IRS1(Ser302)钠钾ATP酶通道蛋白体

LRRC10英文名称：phospho-IRS1(Ser332 + Ser336)AGXT2L2蛋白体

LRCH2英文名称：phospho-IRS1(Ser612)β淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1体

LRDD英文名称：phospho-IRS1(Tyr1222)锚蛋白重复及SAM结构域蛋白6体

LAMR1(CT)英文名称：phospho-IRS1(Tyr895)二苷核糖转移酶3体

LAMR1英文名称：phospho-IRS1(Ser1101)二苷核糖转移酶5体

phospho-LEF1(Ser42)英文名称：IL-28B/IL-28C苷单脱酶1体

LAP1英文名称：IER2红细胞蛋白Ank1体