详细介绍
操作程序:
由您提供该实验中目的基因的相关资料(如:基因名称、序列等信息),我们共同探讨服务的可能性和技术路线;
商定服务收费、付款方式、服务期限等,并签定技术服务合同。
有您提供实验所需的足够量的实验样本(100mg组织或107个细胞),本公司不接受您提供的RNA样本
PCR所需引物/探针(如果用探针法),可以由您自己提供,也可以委托本公司设计合成(费用另计)。如果由您自己提供,必须是PAGE纯化的高质量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探针。
我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。
提供实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。
产品名称 | 规格 | 货号 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6394 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
二、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
乙酰乙甲氧乙酯 96%4--1-甲基-1H-吡唑 97%小鼠白介-5(IL-5)免疫试剂盒
石墨 99.95% metals basis4--1H-咪唑 97%小鼠白介4(IL-4)免疫试剂盒
石墨 99%,40nm1-(2-乙基)-2-甲基-5-硝基-1H-咪唑 98%小鼠白介35(IL-35)免疫试剂盒
石墨 CP,99.85%1-甲基-D-色氨 96%小鼠白介33(IL-33)免疫试剂盒
石墨 D50<400nm,99.95%2-磺酰 98%小鼠白介31(IL-31)免疫试剂盒
石墨 99.95%,8000目(S)-2-硝基-6,7-二氢-5H-咪唑并[2,1-b][1,3]恶-6- 98%小鼠白介3(IL-3)免疫试剂盒
镱 99.9%,块状吡唑-3-甲酰 97%小鼠白介2受体β(IL2rb/CD122)免疫试剂盒
镱粉 99.9%1H-吡唑-3- 98%小鼠白介2可溶性受体α链(sIL-2Rα/CD25)免疫试剂盒
茜红 AR,≥80.0%(HPLC)2,2,2-三 98%小鼠白介29(IL-29)免疫试剂盒
茜黄GG IND二叔戊酰 98%小鼠白介28A(IL-28A)免疫试剂盒
茜黄R AR双(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮)铜 99%小鼠白介28(IL-28)免疫试剂盒
蓝6B IND(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)钇 99%小鼠白介27(IL-27)免疫试剂盒
天青I Biological stain烯 AR,>99%(GC),包含180-200 ppm MEHQ 稳定剂小鼠白介25(IL25/C19orf10)免疫试剂盒
天青I 94%烯, GR,>99.5%(GC)小鼠白介23(IL-23)免疫试剂盒
天青Ⅱ Biological stain烯丁酯 AR,99%小鼠白介22(IL-22)免疫试剂盒
鸡源性核酸检测试剂盒48T 0.2PCR管小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒,3-邻二甲抑制蛋白结构域蛋白4抗体
小鼠环磷鸟(cGMP)ELISA试剂盒,1-Boc-4-溴甲基哌啶雌二抗体
大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激(MIS/AMH)ELISA试剂盒,1-Boc-4-溴甲基哌啶淀粉样蛋白β前体样蛋白2抗体
大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒,3-溴甲淀粉样蛋白β前体样蛋白1抗体
大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒,3-溴甲转录激活蛋白crsp70抗体
大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒,3-溴甲卵巢、胎盘、前列腺、蛋白22抗体
大鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒,4-吡啶锚蛋白重复结构域蛋白33B抗体
猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒,4-吡啶载脂蛋白C3抗体