非洲绿猴肾细胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2培养

细胞名称  非洲绿猴肾细胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2培养
形态特性 上皮样细胞

品牌 贴壁生长

特征特性 Vero-HCV-E2细胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因，能稳定表达E2蛋白，是HCV基础研究的*摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

传代方法 1：

3传代,2-3天传一代  

传代情况 C40

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-FOXO4/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-NKG2D/CD314 /FITC 荧光素标记NK细胞受体/自然杀伤细胞活化性受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BTBD17 BTB/POZ结构域蛋白17抗体 规格 0.2ml

ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原 0.5mg

HE4 英文名称： 附睾分泌蛋白4抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh RIT1 RIT1蛋白抗体 规格 0.2ml

Anti-NKG2D/CD314 /FITC 荧光素标记NK细胞受体/自然杀伤细胞活化性受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
INH-A(Mouse Inhibin) ELISA Kit 小鼠抑制素AMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-CD170/Siglec-5/FITC 荧光素标记唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素5抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/APC APC标记的驴抗人IgG 规格 0.1ml

PV ELISA Kit 鱼卵黄高磷蛋白 96T

MeCP2 英文名称： 甲基化CpG结合蛋白2抗体 0.1ml

ARHGAP20 英文名称： Rho GTP酶激活蛋白20抗体 0.2ml

Anti-CD170/Siglec-5/FITC 荧光素标记唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素5抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rabbit Anti-human k-chain 兔抗人k-链 1mg

Laminin 2 alpha 英文名称： 层粘蛋白α2抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh DOK3 对接蛋白3抗体 规格 0.2ml

AECA(Mouse anti-endothelial cell antibody) ELISA Kit 小鼠抗内皮细胞抗体Multi-class antibodies规格： 48T

phospho-alpha B Crystallin (Ser59) 英文名称： 磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体 0.1ml

Anti-Phospho-c-Fos (Ser32) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化c-fos抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
MT ELISA Kit 大鼠金属硫蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-MAP1A 微管相关蛋白1A抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗鸡IgG 规格 0.1ml

EK(Human epidermal keratin) ELISA Kit 人表皮角蛋白 96T

Nestin 英文名称： 巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 0.1ml

BRCA1 英文名称： 癌易感基因1抗体 0.1ml

Anti-MAP1A 微管相关蛋白1A抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。