SV40转化的非洲绿猴肾细胞；COS-7培养

细胞名称  SV40转化的非洲绿猴肾细胞；COS-7培养
形态特性 成纤维细胞样　

品牌 贴壁生长

特征特性 该细胞株源自CV-1细胞株，经转染起始点缺失的SV40病毒突变体得到；编码表达野生型T抗原，所以该细胞适合作为需要SV40 T抗原表达的载体的转染宿主。该细胞表达T抗原，允许SV40病毒的溶解性生长，支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制，支持起始区域缺陷的SV40突变体的复制。因含有SV40病毒的DNA序列，该细胞需要在2级生物安全柜中操作。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H
SV40转化的非洲绿猴肾细胞；COS-7培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-EGFR /Gold 金标记表皮生长因子受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.5ml

Anti-MYL3/Myosin light chain 3/Biotin 生物素标记 肌球蛋白轻链3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C2orf57 2号染色体开放阅读框57抗体 规格 0.2ml

CCR-1(CC chemokine receptor 1) 细胞表面趋化因子受体1抗原 0.5mg

HDL 英文名称： 高密度脂蛋白抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh SAMD9 SAMD9蛋白抗体 规格 0.2ml

Anti-MYL3/Myosin light chain 3/Biotin 生物素标记 肌球蛋白轻链3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Inhibin Alpha 抑制素α抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽脑脊髓炎病毒AEV抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser149) 磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体 规格 0.1ml

溴化已锭染色液 -红色 1ml Sigma原料,自产

Wnt1 英文名称： 信号通路Wnt1抗体 0.1ml

Dynorphin A 英文名称： 脑啡肽A抗体 0.2ml

Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽脑脊髓炎病毒AEV抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/Bio 生物素标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml

FNBP1L 英文名称： FNBP1L蛋白抗体 0.2ml

DEK癌基因结合蛋白 anti-DEK oncogene 0.1ml

Anti-PAX9/FITC 荧光素标记配对盒基因9抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Troponin I(Ser23/24) 磷酸化钙调节蛋白-1抗体 规格 0.1ml

Goat Anti-Guinea IgG/FITC 荧光素标记羊抗豚鼠IgGMulti-class antibodies规格： 0.3ml
B7-2/sCD86 ELISA Kit 大鼠可溶性CD86Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-VEGFR1 血管内皮生长因子受体1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh gamma Synuclein 核突触蛋白-γ抗体 规格 0.1ml

EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子 96T

NOX2 英文名称： NADPH氧化酶2抗体 0.1ml

phospho-ATG3 (Tyr18) 英文名称： 磷酸化自噬相关蛋白3抗体 0.1ml

Anti-VEGFR1 血管内皮生长因子受体1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。