恒河猴肾细胞；LLC-MK2培养

细胞名称  恒河猴肾细胞；LLC-MK2培养
形态特性 上皮细胞

品牌 贴壁生长

特征特性 LLC-MK2细胞株源自六只成年绿猴的肾细胞悬液。 据报道这个细胞对很多病毒敏感，包括肠道病毒、鼻病毒、粘病毒和痘病毒家族中的成员。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清，10%

传代方法 消化3-5分钟。1：

2。3天内可长满。  

传代情况 PN5

冻存条件 *培养基+8%DMSO

支原体检测 阴性　

STR

同工酶

染色体

使用权限 A类

恒河猴肾细胞；LLC-MK2培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-factor VIII/FITC 荧光素标记第八因子相关抗原抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-N-cadherin /FITC 荧光素标记N-钙粘附分子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C16orf7/ATP-BL 16号染色体开放阅读框7抗体 规格 0.2ml

PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor) D型-过氧化酶活化增生受体(多肽) 0.5mg

HDC 英文名称： L-组酸脱羧酶抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh RNF8 环指蛋白8抗体 规格 0.2ml

Anti-N-cadherin /FITC 荧光素标记N-钙粘附分子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Insulin Receptor(ISR) 胰岛素受体(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-CD23/Fc EpsilonR II CD23抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PALB2 癌易感基因相关蛋白2 规格 0.1ml

CEACAM5 Kit Human 人 CEACAM5 / CD66e ELISA配对抗体 ELISA

TEF3 英文名称： 转录增强因子TEF3抗体 0.2ml

CPA6 英文名称： 胰羧肽酶A6抗体 0.2ml

Anti-CD23/Fc EpsilonR II CD23抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml

FAF1 英文名称： Fas相关1因子抗体 0.1ml

表皮生长因子受体抗体 Anti-EGF-R 0.1ml

anti-PDI/FITC 荧光素标记蛋白质二硫键异构酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 磷酸化转录因子3抗体 规格 0.1ml

Avidin/FITC 荧光素标记亲合素Multi-class antibodies规格： 0.1ml
IGFBP-2 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Protein C/FITC 荧光素标记APC活化蛋白C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM76B FAM76B蛋白抗体 规格 0.2ml

EGF(Human Epidermal growth factor) ELISA Kit 人表皮生长因子 96T

Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222) 英文名称： 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗体 0.1ml

ACSL1 英文名称： 长链脂肪酸辅酶A连接酶1/2抗体 0.2ml

Anti-Protein C/FITC 荧光素标记APC活化蛋白C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。